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抗體儲存知多少,信帆生物為您答疑解惑!
一:低溫對抗體的保存至關重要
一般來說,抗體存放在≤4℃的清潔,滅菌的玻璃或塑料管。貯存在室溫下通常會由于微生物的生長導致抗體退化和/或失活。抗體儲存液放在4℃環境中1天或者幾周內其活性不會受到明顯影響。另外,抗體中可以加入終濃度為50%的甘油或乙二醇儲存于-20℃。通常我們為了避免反復凍融,可以分裝抗體。還可以加入抗微生物藥物(如*或硫柳汞)以避免微生物的生長。帶有標記的抗體通常可以在甘油或乙二醇中于-20℃保存1-2年。但是,在冷凍保護劑的污染物可能會影響酶的活性。
一些研究人員發現多克隆抗體在血清中于-20℃保存十年其活性損失不大。然而,一旦抗體被純化后,儲存在50%的甘油中于-20℃保存,即使沒有凍融,其活性的損失也可以觀察到,盡管其進程仍然非常緩慢。單克隆抗體可以用兩種方式保存:*,保存在50%的甘油存放于-20℃;第二,也是比較好的方式,將其保存在飽和硫酸銨于4℃或-20℃(4℃更好)保存。在大多數情況下,凍干的抗體是存放在-20℃。
二:向抗體儲存液中加入抗氧化劑是防止抗體因氧化失效的關鍵步驟
氧化反應是某些酶,尤其是巰基酶的共同問題。為了防止氧化反應對抗體的破壞,我們可以向抗體中加入一些還原劑(如二硫蘇糖醇(DTT)或 巰基乙醇(2-ME))。實驗證明:越高的pH環境和溫度,有酶活性的抗體的保存時間越短。此外,加入0.1mM的銅離子,其氧化率增加;而加入金屬螯合劑EDTA可增加有效期。
三:蛋白質穩定劑和抗生素對抗體的穩定儲存發揮著重要作用
蛋白質穩定劑可以延長大多數蛋白質在4℃或-20℃的保質期。而25-50%的甘油或乙二醇等防凍劑有助于穩定抗體,防止在-20℃環境中形成冰晶,避免其破壞蛋白質的結構。蛋白酶抑制劑的加入可以防止抗體發生水解反應導致其失活。而抗微生物藥物,如zui終濃度在0.02-0.05%(W / V)的*(NaN3的)或終濃度為0.01%(W / V)的硫柳汞可以抑制微生物的生長。
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