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ELISA實驗代測之ELISA實驗樣本的收集方法-上海信帆

時間:2016/7/18閱讀:1296
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ELISA實驗代測之ELISA實驗樣本的收集方法-上海信帆。本公司供應ELISA試劑盒,提供ELISA實驗代測服務,歡迎大家!

在收集樣本前都必須有一個完整的計劃,必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。對收集后
當天就進行檢測的樣本,及時儲存在4℃備用。對于隔天再檢測的樣本,及時分裝后凍存在-
20℃備用,有條件的,-70℃凍存備用。標本應避免反復凍融。
液體類標本: 包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20 分鐘,離心20 分鐘左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集
上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。
2. 血漿:應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20 分鐘后,離
心20 分鐘左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再
次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20 分鐘左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上清,保存過程
中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
4. 細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20 分鐘左右(2000-3000 轉/
分)。仔細收集上清。
5. 培養細胞:檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100
萬/ml 左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。
離心20 分鐘左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再
次離心。
6. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。
標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑,
用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20 分鐘左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上清。
分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
7. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進
行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.
8. 不能檢測含NaN3 的樣品,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

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