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上海博研生物工程研究中心
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更新時間:2015-04-20 16:13:08瀏覽次數(shù):75次
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人髓母細胞瘤細胞,D341Med進口細胞基本特性
形態(tài)特性:圓形
生長特性:懸浮生長
特征特性:人髓母細胞瘤細胞,D341Med細胞.該細胞系是1984年由Friedman等建立的;在裸鼠體內(nèi)可以成瘤。該細胞系中纖維原蛋白、*合成酶、神經(jīng)元*烯醇酶陽性,但神經(jīng)膠質(zhì)纖維蛋白、S-100蛋白陰性;UJ13A單克隆抗體檢測該細胞神經(jīng)外胚層抗原陽性;c-myc癌基因高表達。
培養(yǎng)條件: MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced
Salts) 10%FBS;1%NEAA+1mM丙銅酸鈉
傳代方法:維持細胞濃度在 0.4~1×106 cells/ml,每周換液2~3次。
傳代情況:C9
凍存條件:基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測:培養(yǎng)法(-)
STR:Amelogenin:X,Y;CSF1PO:10,11;D13S317:11,13;D16S539:12,14;D18S51:12,17;D19S433:13;D21S11:30,31;D2S1338:17;D3S1358:16,18;D5S818:11,12;D7S820:9,13;D8S1179:14;FGA:19,23;TH01:6,9.3;TPOX:8,11;vWA:17,18;
染色體:45~48,XY
使用權(quán)限:A類
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客戶收到細胞后,請鏡下觀察細胞,用恰當方式處理細胞。若懸浮的細胞較多,請離心收集細胞,接種到一個新的培養(yǎng)瓶中。棄掉原液,使用新鮮配制的培養(yǎng)基,使用進口胎牛血清. 剛接到細胞,若細胞不多時 血清濃度可以加到15%去培養(yǎng)。若細胞迏到80%左右 ,血清濃度還是在10%。
操作臺的滅菌處理:
1)無菌室及無菌操作臺(laminarflow)用紫外燈照射30-60分鐘滅菌,70%ethanol擦拭無菌操作抬面,并開啟無菌操作臺風(fēng)扇運轉(zhuǎn)10分鐘。
2)細胞用的培養(yǎng)基如有相同切記不可共享培養(yǎng)基,以避免失誤混淆或細胞間污染。 (注:實驗操作應(yīng)在抬面之*無菌區(qū)域,勿在邊緣之非無菌區(qū)域操作。)
培養(yǎng)細胞將復(fù)合細胞計數(shù)要求的細胞懸液分裝入培養(yǎng)瓶內(nèi),將培養(yǎng)瓶放入37℃和5%CO2的培養(yǎng)箱內(nèi)2-4小時(或者24-48小時)后換液繼續(xù)培養(yǎng)培養(yǎng),換液的時間由細胞情況而定。
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