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新手操作ELISA實驗之前需要做哪些準備?

閱讀:550發布時間:2015-4-9

近些年來,免疫學分析方法發展很快,特別是在使用標記了的抗原和抗體的分析技術以后,使原來許多經典的分析方法在敏感性和特異性方面都不能相比。ELISA試劑盒有著高特異性、靈敏性等優點,接觸ELISA實驗的科研檢測員也越來越多,那么ELISA新手操作實驗之前需要做哪些準備?

①標本制備要規范,每份標本體積要按2-3個復孔以上的量制備(貯存),盡量分裝做備份。短期內無法實驗者,注意低溫保存。

②備好所有實驗額外所需物品,如試管、吸頭、移液器、離心機等。

③根據檢測標本數量確定所需試劑的量。

④按說明書將所用試劑平衡至室溫,配制所需試劑。

⑤ 選擇抗體時選擇一個單抗和一個多抗進行配對;若選擇兩個單抗,必須識別不同表位的抗體;從同一家公司選擇抗體對。

⑥ ELISA實驗中為了確定*信號和zui低背景應將捕獲抗體(0.5-4μg/ml)和檢測抗體(0.25-2μg/ml)在預實驗中進行彼此相抗的滴定。同時,應包括在適當范圍內的標準品的系列稀釋。按試劑說明書常規提供的范圍進行操作。

⑦一般待測抗原標準曲線的線性范圍的可通過將標準品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml到15pg/ml。可利用標準的ELISA操作流程、放大試劑盒、第三類試劑、或改變酶底物系統可在一定范圍內提高靈敏度。

⑧若使用過氧化物酶作為顯色系統,應嚴禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉,疊氮鈉可抑制過氧化物酶的活性。

⑨標準品的配制:對于每種細胞因子應仔細閱讀說明書,注意每批的細節。在使用細胞因子前,瞬時離心試劑瓶,盡可能多地收回其中的細胞因子。根據每批說明書中的細節,將凍干的細胞因子復溶。


博研生物ELISA試劑盒服務標準:

1.有質量問題免費包換,合同上注明了的.(質量問題包括運輸不當,客戶在使用過程中測不出結果,等等!)
2.全程技術指導。(包括售前的標本收集,使用過程中不明白的地方,實驗結束后的數據分析,有任何疑問,我們技術都會即時給你去電)
3.提供免費代測的服務。(你只需把標本寄過來,我們為你節省時間,幫你出結果,原始數據,分析數據均可提供,一般時間是5天左右)
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