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免疫親和柱凈化-柱后光化學衍生-高效液相色譜法檢測糧油中黃曲*毒素

閱讀:431發布時間:2020-9-7

    目前對食品、農產品中黃曲*毒素的檢測方法主要有薄層色譜法、酶聯免疫吸附法、免疫親和柱凈化熒光光度法和免疫親和柱凈化高效液相色譜法等,前2種方法定量準確度較差,第3種方法只能測定黃曲*毒素總量。免疫親和柱凈化-柱后光化學衍生高效液相色譜法具有簡便、快速、凈化效果好的特點。

 儀器準備

 

儀器簡介

    LC-600A智能全控液相色譜系統由P600高壓恒流泵與UV600紫外檢測器直接構成等度分析系統。使用WS600工作站可以同時控制數臺P600高壓恒流泵、UV600紫外檢測器及恒溫柱箱等,實行多元高壓洗脫、波長掃描等功能。

應用領域

化合物檢測、法醫毒物分析、蛋白質組學食品檢測、藥物分析、環境分析、聚合物分析 

提取與凈化:

   準確稱取25.0g糧油樣品于250mL均質杯中,加入5g氯化鈉、125mL甲醇-水(體積比為70:30),高速均質2min,用槽紋濾紙過濾到干凈的燒杯中。取20mL濾液,加入20mL水稀釋混勻,用玻璃纖維濾紙過濾。取濾液10mL,以1-2滴/s的速率將其通過Afla-Test P免疫親和柱,直至空氣吹出柱內的全部液體,再用10mL超純水以1-2滴/s淋洗親和柱直至空氣吹出柱內的全部液體。*后用1mL色譜純甲醇淋洗親和柱,收集淋洗液于玻璃試管中,加1.0mL純水于洗脫液中,旋渦混勻器混勻供HPLC測定。

譜條件:

色譜柱

Cloversil C18柱(4.6mm i.d.×150mm×5.0μm)

流動相

甲醇-水(50:50)溶液

流速

1mL/min

熒光檢測器

激發波長360nm,發射波長440nm

柱溫

30℃

進樣量

20μL,進樣前2min打開光化學衍生池檢測黃曲*毒素

譜圖分析

 

 

 


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