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高效液相色譜法測定發(fā)酵食品中組胺的含量

閱讀:540發(fā)布時間:2020-8-26

   生物胺是一類具有生物活性含氮的低分子量有機化合物的總稱。可以看作是氨分子中1-3個氫原子被烷基或芳基取代后而生成的物質(zhì),是脂肪族、酯環(huán)族或雜環(huán)族的低分子量有機堿,常存在于動植物體內(nèi)及食品中。生物胺引起的食品安全問題,也就是生物胺的毒性作用。其中組胺對人類健康的影響*大,其次是酪胺。除了組胺、酪胺本身的作用外,其他生物胺的存在會增強組胺和酪胺的不良作用。

   高效液相色譜具有分析速度快、柱效高、檢測靈敏度高、定量分析準(zhǔn)確的特點,是目前食品中生物胺含量分析測定的主要手段。生物胺分子中缺少發(fā)色基團,本身既無紫外吸收、又無熒光及電化學(xué)活性。為了提高檢測的靈敏度及其響應(yīng),必須衍生后才能檢測。

   本文以丹酰氯為衍生試劑,采用柱前衍生--高效液相色譜法來分析食品中組胺的含量,通過對市售不同品牌的大豆發(fā)酵制品(豆豉、豆醬和醬油)、酸奶和啤酒中組胺含量的測定,對各種食品的組胺含量有一個初步的了解,為保障食品安全提供技術(shù)依據(jù)。

 儀器準(zhǔn)備

 

 

儀器簡介

    LC-600A智能全控液相色譜系統(tǒng)由P600高壓恒流泵與UV600紫外檢測器直接構(gòu)成等度分析系統(tǒng)。使用WS600工作站可以同時控制數(shù)臺P600高壓恒流泵、UV600紫外檢測器及恒溫柱箱等,實行多元高壓洗脫、波長掃描等功能。

 

應(yīng)用領(lǐng)域

化合物檢測、法醫(yī)毒物分析、蛋白質(zhì)組學(xué)食品檢測、藥物分析、環(huán)境分析、聚合物分析

 

柱前衍生

取樣品提取液0.25mL,加入25μL2mol/L的氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH值,加入75μL飽和*溶液和0.5mL10mg/mL丹酰氯-丙酮溶液,搖勻,于40℃水浴下避光反應(yīng)45min;反應(yīng)畢,取出加入25μL25%的濃氨水,靜置30min,用乙腈定容至1.25mL,振蕩混勻。將衍生后溶液用0.45μm針頭微孔濾膜過濾器過濾,用高效液相色譜測定。

 

 

譜條件:

 

色譜柱

Hypersil-C18色譜柱(250×4.6mm I.D .粒徑5μm

柱溫

室溫

流動相

V(乙腈):V(水)=60:40

流速

1.0mL/min

紫外檢測波長

254nm

進(jìn)樣量

20μL

采樣時間

30min

 

 

譜圖

 


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