液相色譜儀流動相類型與性質
液相色譜儀流動相類型有多種,流動相性質對樣品的分離影響很大。
一、流動相類型:
1、按組成可分:單組分流動相和多組分流動相。
2、按極性可分:極性流動相、弱極性流動相和非極性流動相。
3、按作用可分:底劑和洗脫劑。
4、按使用方式可分:等度流動相和梯度流動相。
5、按用途可分:己烷、甲苯、乙酸乙酯、乙醇、乙腈和水等。
采用二元或多元組合溶劑作為流動相,可以靈活調節流動相的極性和增加選擇性,改進分離和調整出峰時間。
二、流動相性質:
1、底劑決定基本的色譜分離,洗脫劑對某幾個組分選擇分離。流動相組成改變,極性改變,可顯著改變組分分離狀況。
2、親水性固定液常采用疏水性流動相,即流動相的極性小于固定相的極性,稱為正相液液色譜,極性柱稱正相柱,正相柱的底劑用低極性溶劑,洗脫劑用極性較強的溶劑。
3、若流動相的極性大于固定液的極性,稱為反相液液色譜。非極性柱稱為反相柱,反相柱常以水為流動相的主體,再加入不同配比的有機溶劑做調節劑。
液相色譜流動相是液體,對組分有親合力,并參與固定相對組分的競爭,正確選擇流動相溶劑直接影響樣品組分的分離。
一、溶劑對于待測樣品必須具有合適的極性和良好的選擇性。
二、溶劑與檢測器匹配:
對于紫外吸收檢測器,不能用對紫外光有吸收的溶劑。
對于示差折光檢測器,要求選擇與組分折光率有較大差別的溶劑作流動相,以達到高靈敏度。
三、高純度:
由于液相色譜靈敏度高,對流動相溶劑的純度要求高。不純的溶劑會引起基線不穩或產生假峰。
四、化學穩定性好。
五、粘度適中:
若溶劑粘度高,會增高壓力,不利于分離。常用的低粘度溶劑有丙酮、甲醇和乙腈等。
粘度過低的溶劑不宜采用,如戊烷等,它們容易在色譜柱和檢測器內形成氣泡,影響分離。