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南京科捷檢測科技發展有限公司
閱讀:1291發布時間:2017-6-21
在蘋果汁加工過程中,酚類物質與果汁中的蛋白質結合,形成大分子的聚合物,從而使蘋果汁產生沉淀,影響蘋果汁的產品質量。酚類物質是果實在生長代謝中的次生產物,它對植物的生長發育和調 節、基因的誘導表達、信號轉導、紫外輻射的吸收、果蔬產品的褐變、生物固氮有一定的影響。
實驗利用液相色譜分析酚類物質,采用反相C18柱,具有快速、操作簡單、分離效果好和同時能將不同酚類物質分開等優點。
儀器設備
LC-600B智能全控液相色譜系統由2臺P600B高壓恒流泵、1臺UV600B紫外檢測器與1臺SCL600B系統控制器直接構成梯度分析系統。*采用柱塞浮動式安裝方式,增強儀器性能的穩定性和使用的持久性。可廣泛應用于研究開發、醫藥檢驗、食品檢測、化工分析、環境監測等眾多分析領域。
色譜分析條件
色譜柱 | Discovery C18柱150mm×4.6mm,Φ5μm |
流動相 | 甲醇和水 |
柱溫 | 30℃ |
流速 | 1.2mL/min |
進樣量 | 10μL |
檢測器 | 紫外檢測器 |
波長 | 280nm |
線性梯度洗脫 | 0~35min 98%甲醇和水;35~65min 68%甲醇和水;65~70min 98%甲醇和水。 |
樣品的制備
(1)分析樣品的制備:蘋果皮5g(或肉10g),加入1mL 6mol/L的HCl,放置于石英砂中研磨;加50mL的蒸餾水用1 mol/L的HCl調pH至2.0;然后每次加入50mL的乙酸乙酯,萃取兩次,攪拌5min,離心,分離出酯相和水相;將水相用6 mol/L的NaOH調pH至7.0,每次加入50mL的乙酸乙酯萃取2次,分離出酯相。將酯相在30℃下旋轉蒸發,用N2氣吹干,再用1mL的甲醇定容。
(2)果汁樣品的制備:蘋果汁50.0mL用1 mol/L的HCl調pH至2.0,然后每次加入50mL的乙酸乙酯萃取兩次,攪拌5min,離心,分離出酯相和水相。酯相和水相的處理方法與分析樣品的制備方法一樣。
色譜圖分析:
酚類物質標準樣品的液相色譜圖
1—兒茶酚; 2—兒茶素; 3—綠原酸; 4—表兒茶素;
5—根皮苷; 6—楊梅黃酮; 7—桑色素; 8—槲皮素;
9—柚苷; 10—山*素; 11—芹菜素
蘋果果肉酚類物質液相色譜圖
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