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液相色譜儀測定蜂蜜中的果糖、葡萄糖和蔗

閱讀:1028發(fā)布時間:2017-6-20

蜂蜜是一種高度復(fù)雜的糖類過飽和混合物。它的主要成分是碳水化合物,含有果糖、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖、松二糖和糊精等20余種。蜂蜜中的糖類占總成分的70%~80%,蜂蜜中以單糖(果糖、葡萄糖)為主要成分,約占總成分的60%以上,其次是雙糖,雙糖中以蔗糖占優(yōu)勢,成熟的蜂蜜平均不超過5%(少數(shù)品種例外),更多的則在1%~3%左右。

 

GB18796-2005《蜂蜜》中規(guī)定蜂蜜中不得添加或混入任何糖類、代糖類物質(zhì),不得添加或混入任何防腐劑、澄清劑、增稠劑等異物,并規(guī)定了對蜂蜜摻假的檢測方法和判定原則。

實驗采用液相色譜法測定蜂蜜中的果糖、葡萄糖和蔗。

 

一、儀器設(shè)備

LC-600B梯度液相色譜儀

 

 

LC-600B智能全控液相色譜系統(tǒng)由2臺P600B高壓恒流泵、1臺UV600B紫外檢測器與1臺SCL600B系統(tǒng)控制器直接構(gòu)成梯度分析系統(tǒng)。*采用柱塞浮動式安裝方式,增強儀器性能的穩(wěn)定性和使用的持久性。可廣泛應(yīng)用于研究開發(fā)、醫(yī)藥檢驗、食品檢測、化工分析、環(huán)境監(jiān)測等眾多分析領(lǐng)域。

 

二、實驗方法

1.標準溶液配制

標準貯備液配制:分別稱取果糖、葡萄糖、蔗糖標準品5g、4g、1g,至0.0001g,放入100mL容量瓶中,加入60mL水溶解,乙腈定容至體積,搖勻。

標準工作溶液配制:吸取不同體積的果糖、葡萄糖、蔗糖標準貯備溶液,用乙腈+水(40+60)稀釋至體積,配成不同濃度的果糖、葡萄糖、蔗糖標準工作溶液,用于繪制標準工作曲線。

2.試樣制備

對無結(jié)晶的實驗室樣品,將其攪拌均勻,對有結(jié)晶的樣品,在密閉的情況下,置于不超過60℃的水浴中溫熱,振蕩,待樣品全部融化后攪勻,冷卻至室溫。

3.稱量提取

稱取5g試樣,至0.001g,置于100mL燒杯中,加入30mL水,用玻璃棒攪拌使試樣*溶解,轉(zhuǎn)移至100mL容量瓶中, 然后再用10mL水洗燒杯3次并轉(zhuǎn)移至上述100mL容量瓶中,用乙腈定容至體積,混勻(同時做兩個平行樣及試劑空白樣),靜止片刻后,取上清液用0.45u濾膜過濾進樣。

 

三、色譜條件

色譜柱

Kromsil氨基柱4.6μm×250mm

流動相

乙腈∶水=70∶30(使用前過濾并超聲脫氣)

流速

1mL/min

檢測器溫度

30℃

進樣量

10μL

 

 


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