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液相色譜儀同時(shí)測(cè)定生物質(zhì)乳酸發(fā)酵液中有機(jī)酸及糖類化合物

閱讀:800發(fā)布時(shí)間:2017-6-15

乳酸(lactic acid),化學(xué)名稱為2-羥基丙酸,分子式為CH3CH(OH)COOH,是一種含有羥基和羧基的有機(jī)酸,廣泛存在于人體、動(dòng)物、植物和微生物中,是食品工業(yè)中常用的酸味劑和防腐劑,也是醫(yī) 藥、化工、皮革、香料等工業(yè)的重要的原料。在乳酸發(fā)酵過程中,伴隨產(chǎn)物乳酸生成的同時(shí)還有其他一些有機(jī)酸作為副產(chǎn)物而釋放到環(huán)境中

用生物質(zhì)水解液發(fā)酵制取乳酸(以下簡(jiǎn)稱生物質(zhì)乳酸)是近年來乳酸生產(chǎn)工藝改進(jìn)的重要方向。測(cè)定生物質(zhì)乳酸發(fā)酵液中糖及各種有機(jī)酸代謝成分組成的變化,對(duì)揭示其代謝途徑以及控制發(fā)酵過程,進(jìn)而從代謝工程角度改良菌種和優(yōu)化發(fā)酵工藝條件具有重要的意義。

實(shí)驗(yàn)采用液相色譜法同時(shí)測(cè)定生物質(zhì)乳酸發(fā)酵液中有機(jī)酸及糖類化合物。

 

儀器設(shè)備:

LC600B等度液相色譜儀

 

LC-600B智能全控液相色譜系統(tǒng)由1臺(tái)P600B高壓恒流泵、1臺(tái)UV600B紫外檢測(cè)器與1臺(tái)SCL600B系統(tǒng)控制器直接構(gòu)成等度分析系統(tǒng)。*采用柱塞浮動(dòng)式安裝方式,增強(qiáng)儀器性能的穩(wěn)定性和使用的持久性。廣泛應(yīng)用于研究開發(fā)、醫(yī)藥檢驗(yàn)、食品檢測(cè)、化工分析、環(huán)境監(jiān)測(cè)等眾多分析領(lǐng)域。

 

超純水設(shè)備

 

 

依照“層層保護(hù),逐級(jí)過濾”的設(shè)計(jì)理念,水質(zhì)電阻率可達(dá)到18 25ΜΩ·cm(25℃),適用于各種標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)、痕量分析、原子吸收、熒光分析、生化分析、環(huán)境分析、血清檢查等用水。廣泛應(yīng)用于材料科學(xué)、生命科學(xué)、空間技術(shù)等領(lǐng)域中以及食品、藥品、自然環(huán)境中微量元素和重金屬元素檢測(cè)實(shí)驗(yàn)。

 

樣品預(yù)處理

取5mL發(fā)酵液,離心(10000r/min, 5min)除去菌絲體和碳酸鈣,取上清液稀釋適當(dāng)倍數(shù);取1mL的稀釋液加入0.05mL的72%硫酸進(jìn)行酸解使有機(jī)酸游離出來,離心(10000r/min,3min)除去硫酸鈣,然后用0.22μm的濾膜過濾即得待測(cè)液。

 

色譜參考條件

色譜柱

Bio-Rad Aminex HPX-87H色譜柱(300mm×7.8mm,9μm)

流動(dòng)相

5mmol/LH2SO4

流速

0.6mL/min

柱溫

55℃

進(jìn)樣量

10μL

 

 


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