本公司所銷售的大鼠白介素3elisa試劑盒只供科研,保證質(zhì)量,如有任何質(zhì)量問題,本司一律包退包換,咨詢。
大鼠白介素3elisa試劑盒測(cè)試步驟:
(1)仔細(xì)切開覆蓋在孔板上的箔片,從微孔板底部用手指輕輕頂出所用的孔板。注意不要損傷不使用的孔板上的條或孔,而且應(yīng)將其立即用塑料袋密封放入2-8℃的冰箱保存,以防止瓊脂變干;
(2)揭開覆蓋在孔板上的箔片,每孔加入80mL牛奶樣品。并分別加入80mL的陰性和陽性質(zhì)控,加入樣品時(shí)應(yīng)避免交叉污染;
(3)用密封膠將孔板密封,置于65℃恒溫箱或水浴箱中孵育直到陰性質(zhì)控轉(zhuǎn)化成淺黃綠色(參照每批質(zhì)量檢測(cè)報(bào)告,大約需要1小時(shí)45分鐘)。
注:如果是采用水浴進(jìn)行孵育的話,請(qǐng)注意避免水進(jìn)入微孔。樣品孵育時(shí)間不能超過質(zhì)檢報(bào)告中說明的時(shí)間,否則檢測(cè)靈敏度會(huì)下降。
操作不當(dāng)將引起較大的誤差,以下敘述各個(gè)步驟中的影響因素:
1.加樣,加樣時(shí)速度不可太快,避免將標(biāo)本加在孔壁上部 ,并注意不要濺出或產(chǎn)生氣泡,產(chǎn)生氣泡可以減少標(biāo)本與包被物的接觸,降低試劑的敏感性。不要讓吸頭接觸孔底部,以防破壞包被物,吸附血清內(nèi)的蛋白,造成假陽性。
2.溫育,溫育過程中,反應(yīng)板不宜疊放,以保證各板的溫度都能迅速平衡。
3.洗滌,洗滌是ELISA測(cè)定過程中決定實(shí)驗(yàn)成敗的一個(gè)關(guān)鍵步驟。其目的是去除反應(yīng)體系中與反應(yīng)無關(guān)的成分、未結(jié)合的酶結(jié)合物以及反應(yīng)過程中非特異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.顯色,顯色是 ELISA中的zui后一步溫育反應(yīng),顯色受時(shí)間和溫度的影響,一般37℃反應(yīng)30分鐘可使顯色充分,如果縮短反應(yīng)時(shí)間或者降低反應(yīng)溫度均可影響檢測(cè)的下限。
5.比色,ELISA顯色的結(jié)果必須通過酶標(biāo)儀進(jìn)行檢測(cè),有兩個(gè)重要的原因:一是不同的個(gè)體的色覺存在差異,如果僅憑肉眼判斷,則結(jié)果重復(fù)性差,并且難以形成統(tǒng)一的判斷標(biāo)準(zhǔn),尤其是對(duì)于HBeAb、HBcAb這樣的檢測(cè)項(xiàng)目;二是日益頻繁的醫(yī)療糾紛要求臨床實(shí)驗(yàn)室必須對(duì)ELISA檢測(cè)的原始吸光度值,陰陽性判斷結(jié)果等原始數(shù)據(jù)進(jìn)行保存,否則面對(duì)醫(yī)療糾紛時(shí)將無法舉證。
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