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大鼠可溶性P選擇素(sP-selectin)elisa試劑盒操作步驟：
1.加樣：分別設空白孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔加待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應120分鐘。
2.棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加辣根過氧化物酶標記抗小鼠IgG工作液100μl（取1μl*標記抗體加99μl*標記抗體稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內配制），37℃，60分鐘。
3.溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干。
4.依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光顯色（30分鐘內，此時肉眼可見孔內有明顯藍色，即可終止）。
5.依序每孔加終止溶液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性，底物反應時間到后應盡快加入終止液。
6.用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后15分鐘以內進行檢測
“大鼠可溶性P選擇素(sP-selectin)elisa試劑盒"實驗在做到嚴格要求的同時有著一些不能忽視的小細節：
1.用槍吸取液體時速度不能太快，以免產生氣泡而使吸取量不準確。
2.液體全部加完后，可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒，混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
3.洗液不夠時，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可*保存。
4.吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。
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