中文名稱:兔血管內皮細胞粘附分子1elisa試劑盒
英文名稱:Rabbit Vascuolar cell adhesion molecule 1,VCAM-1 elisa kit
操作程序:
① 加抗體包被 → 4℃**,洗滌三次、拋干
② 加待檢抗原 → 37℃ 30分鐘,洗滌三次、拋干
③ 加酶標抗體 → 37℃ 30分鐘,洗滌三次、拋干
④ 加底物液 → 37℃ 15分鐘,加終止液
⑤ 用ELISA檢測儀測定OD值
兔血管內皮細胞粘附分子1elisa試劑盒選擇
◎試劑應從靈敏度、特異性、精密度、穩定性、簡便性、安全性及經濟性全面評價。
◎靈敏度:有二層含義,1)為試劑檢出被檢物質的zui低量的能力;2)為試劑對大量樣品中陽性檢出的能力。
◎特異性:常用交叉反應率表示。含有與待測物相近結構部份的物質可能存在交叉反應,使測定結果升高,可能導致假陽性,所以交叉反應是評價其質量的關鍵指標。
◎精密度:ELISA試劑一般指其批內CV%,其值應小于15%;定量試劑應同時考察線性范圍。
◎準確度:通過添加回收實驗進行評價。
◎簡便性:指在不影響試劑的前三項指標的前題下,實驗和測定步驟越少越好,在定性實驗中結果判斷簡單明了,定量試驗結果計算也應簡單。
◎安全性:指試劑對操作者和環境安全無害無傳染性。
◎經濟性:試劑在同等質量條件下通過大規模生產或技術進步降低成本,而市場價格比較合理。
◎試劑評價:需要有的確證方法和確證的樣品進行檢測。
樣品收集、處理及保存方法
血清
操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g 離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
血漿
EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
細胞上清液
1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
組織勻漿
將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。
保存
如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍