維生素B1廣泛存在于天然食物中，但含量隨食物種類而異，且受收獲、儲存、烹調、加工等條件影響。zui為豐富的食物來源為葵花籽仁、花生、大豆粉、瘦豬肉；其次為小麥粉、小米、玉米、大米等谷物食物；魚類、蔬菜和水果中含量較少。建議食用碾磨度不太精細的谷物，可防止維生素B1缺乏。

硫胺素和其它*一樣，在水果蔬菜的清洗、整理、燙漂和瀝濾期間均有所損失。在谷類碾磨時損失更大。鮮魚和甲殼類體內有一種能破壞硫胺素的酶-硫胺素酶，此酶可被熱鈍化。金槍魚、豬肉、牛肉的血紅素蛋白也有抗硫胺素活性，使用前應加熱處理。另外，含有多羥基酚（如單寧、*、綠原酸）的食物也會通過氧化還原反應使硫胺素失活，如紅色甘藍、黑加侖以及茶和咖啡等。長期食用此類食物有可能造成硫胺素缺乏。

VB1含量豐富的食物有糧谷類、豆類、干果、酵母、硬殼果類，尤其在糧谷類的表皮部分含量更高，故碾磨精度不宜過度。動物內臟、蛋類及綠葉菜中含量也較高，芹菜葉、萵筍葉中含量也較豐富，應當充分利用。土豆中雖含量不高，但以土豆為主食的地區，也是VB1的主要來源。某些魚類及軟體動物體內，含有硫胺素酶，生吃可以造成其他食物中VB1的損失，故“生吃魚、活吃蝦”的說法，既不衛生，也不科學。

維生素B1zui豐富的來源是小麥胚芽及米麩，肝臟的含量并不多。種子發芽時需要這種維生素，因此它存在所有谷類、核果、干豆、豌豆、黃豆、扁豆、及由植物種子未經過加工精制的食物中，如花生醬、面包及麥片等；肉類食品中腎臟、心臟及豬肉里的含量zui豐富。