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血清是血液凝固析出的淡黃色透明液體。如將血液自血管內(nèi)抽出,放入試管中,不加抗凝劑,則凝血反應(yīng)被激活,血液迅速凝固,形成膠凍。關(guān)于血清保存凍融有以下幾點:
1、需要長期保存的血清必須儲存于-20℃冰箱。
2、4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月。
3、由于血清結(jié)冰時體積會增加約10%,血清在凍入低溫冰箱前必須預(yù)留一定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂。
4、血清一般為無菌,因此不用再過濾除菌。
5、如發(fā)現(xiàn)血清有懸浮物,可將血清加入培養(yǎng)液內(nèi)一起過濾,不能直接過濾血清。
6、血清解凍時需采用逐步解凍法,從低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天,然后移入室溫待全部溶解后再分裝。
7、在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻,注意不要產(chǎn)生氣泡,不要產(chǎn)生沉淀。
8、不能直接將血清從-20℃進入37℃解凍,這樣因溫度改變太大容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀。
9、血清滅活是指56℃加熱 30分鐘處理已*解凍的血清,加熱過程中應(yīng)該搖晃均勻,使血清中的補體成分滅活。
10、除非必須,商品化血清不需要滅活處理,熱處理會造成血清沉淀物顯著增多。
11、不能將血清在37℃放置超過2天,血清會變得渾濁,同時降解血清中的有效成分。
12、血清中的沉淀絮狀物主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成,這些絮狀物不會影響血清質(zhì)量,3000rpm離心 5分鐘即可去除。
13、顯微鏡下小黑點是由于經(jīng)過熱處理過的血清,沉淀物的形成會顯著增多,有些沉淀物在顯微鏡呈現(xiàn)為黑點,常誤認為血清受污染。
14、通常,黑點不多時不會影響細胞生長。
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