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人血管緊張素轉化酶elisa試劑盒

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所  在  地鹽城市

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更新時間:2018-03-17 09:03:02瀏覽次數:165次

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產品簡介

人血管緊張素轉化酶elisa試劑盒如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍

詳細介紹

人血管緊張素轉化酶elisa試劑盒樣品收集、處理及保存方法

 血清

操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g    離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

血漿

EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。

細胞上清液

1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

組織勻漿

將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。

保存

如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍 

人血管緊張素轉化酶elisa試劑盒雙抗體夾心法操作步驟:

1. 包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml,4 **。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。   

2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37 孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。

3. 加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.1ml。37 孵育0.5~1小時,洗滌。

4. 加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37 10~30分鐘。

5. 終止反應:于各反應孔中加入2M**0.05ml。

6. 結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+"、“-"號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。

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