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江蘇寶萊生物科技有限公司
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閱讀:148發布時間:2015-9-18
特定組織樣本中的所有細胞不一定都是相同的,它們可能在遺傳內容、組成和功能方面有很大的不同。但是,許多研究和分析技術,旨在了解生物系統如何在細胞水平上起作用,把組織樣本中的所有細胞看作是*相同的,平均整個細胞群體的測量。這很容易看到為什么會發生這樣的事。但是,因為細胞器、信號化學物質,以及遺傳物質的復雜矩陣——且不說其小規模,要放大來區分每一個細胞內發生的事情,并不是輕松的任務。
現在,實驗室已經開發出了一種方法,可同時成像和識別單個細胞內的幾十個分子。這種技術可以為“細胞是如何組織以及彼此之間如何相互作用"提供新的見解,并且,zui終可以提高我們對于許多疾病的理解。
研究人員開發的成像技術,不僅可讓研究人員解析一個細胞內的大量分子,如信使RNA,而且還能系統地標記每一種具有*熒光“條形碼"的分子,所以它可以很容易地進行識別和測量,而不會破壞細胞。
這種新方法使用了一種創新性的連續條形碼方案,將熒光原位雜交進一步升級。FISH利用分子探針——結合熒光染料或熒光素的短DNA片段。這些探針能夠結合或雜交,具有互補序列的DNA或RNA。當用顯微鏡對雜交樣品成像時,熒光團變亮,從而定位目標分子的位置。
有極少數的熒光素,可用于這些探針,研究人員通常使用它們來確定僅僅幾個不同的基因。例如,他們使用一種紅色的染料標記可靶定一種特定mRNA類型的所有探針。當他們影像樣本時,他們會看到細胞中有一堆紅點。然后,他們將采用另一組探針,用藍色熒光標記,看到發光的藍色斑點。
研究團隊意識到,同類少數的熒光可用于連續多輪雜交,以產生數以千計的*熒光條形碼,可以清楚地識別多種類型的分子。
可用條形碼的數量可能是巨大的:FN,其中F是熒光素的數目,N是雜交輪次的數量。因此,有四個染料和八個雜交回合,科學家們將有足夠多的條形碼,以覆蓋一個細胞內所有的約20000個RNA分子。
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