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江蘇寶萊生物科技有限公司
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閱讀:104發布時間:2015-7-10
在受精過程中,卵子和精子融和生成新的胚胎。卵子和精子都是通過減數分裂形成的,細胞在減數分裂時連續分裂兩次,而基因組只復制一次。結果是,精細胞和卵細胞各獲得一半的親代染色體。
已知人類卵母細胞的減數分裂是很容易出錯的,而卵子缺陷是導致妊娠丟失和一些嚴重遺傳疾病的主要原因。那么,是誰在為減數分裂的順利進行保駕護航呢?
研究團隊對此進行了深入研究。他們開發了一個高內涵的表型篩選方法,全面鑒定了哺乳動物卵母細胞中的減數分裂基因。與有絲分裂相比,人們對減數分裂的了解還比較少。系統性篩選是認識有絲分裂基因的有力武器,但這一技術用于哺乳動物減數分裂時還存在一些問題。
研究人員將小鼠卵母細胞的表達譜與其他體細胞以及植入前胚胎進行比較,選出了在卵母細胞高度表達但不參與胚胎發育的774個基因,并且構建了靶標這些基因的siRNA。
為了獲得高通量,研究人員決定一次靶標12個基因,然后通過高分辨率成像分析這些基因的功能。他們通過顯微注射把混合siRNA送入包裹在卵泡里的卵母細胞,在卵母細胞發育的早期階段阻斷蛋白質表達。然后對卵泡進行體外培養,等卵母細胞長大之后將其分離出來。
研究人員通過共聚焦顯微鏡的活細胞成像,觀察了大量卵母細胞的減數分裂過程。他們定量分析了卵母細胞的50種表型,獲得了豐富的減數分裂數據,并在此基礎上鑒定了一些關鍵的基因,比如Dusp7。
這項研究為人們提供了適合卵母細胞的高內涵篩選方法,可以幫助人們全面理解哺乳動物的減數分裂。
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