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elisa實驗包被過程解析

閱讀：673發布時間：2015-5-18

在使用Elisa試劑盒進行實驗的時候，需要注意很多問題，比如溫育、顯色、包被等問題。其中，包被是要特別注意的一個問題，直接關系到實驗的效果。
大分子蛋白質較小分子蛋白質通常含有更多的疏水基團，故更易吸附到固相載體表面。不易吸附的非蛋白質抗原可用間接包被的抗原經固相抗體的親和層析作用，包被在固相上的抗原純度大大提高，因此含雜質較多的抗原也可采用捕獲包被法。
包被用抗原
天然抗原、重組抗原和合成多肽抗原三大類。合成多肽抗原是抗原決定簇的氨基酸序列人工合成的多肽片段。一般只含有一個抗原決定簇，純度高，特異性也高，但由于分子量太小，往往難于直接吸附于固相上。借助于偶聯物與固相載體的吸附，間接地結合到固相載體表面。
包被用抗體
IgG對聚苯乙烯有強吸附力，其聯結發生在Fc段上，抗體結合點暴露于外。取材于抗血清或含單克隆抗體的培養液.須除去雜抗體后才能用于ELISA，以保證試驗的特異性。
腹水中單抗的濃度較高，特異性亦較強，因此不需要作吸收層析處理，直接包被。在某些情況下，用多種單抗混合包被，可取得更好的效果。
加入包被液后，在4-8℃冰箱中放置過夜，37℃中保溫2小時。包被濃度隨載體和包被物的性質可有很大的變化，每批材料需通過實驗與酶結合物的濃度協調選定。一般蛋白質的包被濃度為10ng/ml-20ug/ml。
如果您對考慮購買的ELISA試劑盒還有任何疑問，都可以直接打向我公司咨詢。我司有相應的技術資料提供，您可以從中獲取有價值的產品信息。

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