競爭抑制法可用于抗原和半抗原的定量測定，也可用于測定抗體。以測定抗原為例。
競爭抑制法的原理
小分子抗原或半抗原缺乏可作雙抗體夾心法的2個或2個以上位點，可用競爭法測定。其原理是將待檢抗原和酶標抗原與相應固相抗體競爭結合，標本中抗原越多，與固相抗體結合的酶標抗原越少，與底物反應生成的顏色越淺，因此根據顏色深淺可定量測定。
將特異性抗體吸附于固相載體；加入待測抗原和一定量的酶標已知抗原，使二者競爭與固相抗體結合；經洗滌分離，zui后結合于固相的酶標抗原與待測抗原含量呈負相關。
競爭抑制法的操作步驟
1、用已知特異性抗體包被固相載體（微孔板），形成固相抗體，洗滌除去未結合物；
2、測定孔加入待檢樣品和一定量的酶標抗原，經過溫育，使兩者與固相抗體競爭結合；對照孔只加一定量酶標抗原與固相抗體直接結合。分別洗滌，除去未結合到固相上的游離酶
標抗原及其他未結合物；
3、加底物顯色，對照孔由于只加酶標抗原，與固相抗體充分結合，故分解底物顯色深；測定孔的顯色程度則隨待測抗原和酶標抗原與固相抗體競爭結合的結果而異。如測抗原量多
，競爭性地抑制酶標抗原與固相抗體結合，使固相上結合的酶標抗原量減少。因此，加入底物后顯色反應較弱。即顏色深淺與待測抗原量成反比。分別測定各孔的光密度（OD）值，根據對照孔與測定孔OD值之比，計算標本中待測抗原含量。
同理，也可用固相抗原和酶標抗體做試劑，使固相抗原和標本中的待檢抗原競爭結合酶標抗體。待檢抗原競爭抑制酶標抗體和固相抗原結合，即待檢抗原越多，顯色越淺。
測定抗體的競爭法和測定抗原的競爭法類似，是包被已知抗原，讓待檢抗體與酶標抗體與之競爭結合，加底物顯色。待檢抗體越多，顏色越淺；待檢抗體越少，顏色越深。
競爭抑制法的應用
抗HBc，抗pres2，抗HAV，抗HDV等。
