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更新時(shí)間:2015-07-29 18:00:22瀏覽次數(shù):257次
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*檢測(cè)卡使用說(shuō)明書(shū)
(膠體金法)
1 原理及用途
本產(chǎn)品應(yīng)用競(jìng)爭(zhēng)抑制膠體金免疫層析的原理制成,用于檢測(cè)蜂蜜、組織、肝臟等樣本中的*代謝物(SEM)。
樣本溶液滴入檢測(cè)卡的加樣孔后,樣本溶液中的*代謝物與金標(biāo)抗體相結(jié)合,從而阻止金標(biāo)抗體與纖維素膜上*偶聯(lián)物結(jié)合。當(dāng)樣本溶液中的*代謝物含量大于檢測(cè)*檢測(cè)線不顯色(或顯色比對(duì)照線淺),結(jié)果為陽(yáng)性;當(dāng)樣本溶液中*代謝物含量小于檢測(cè)*檢測(cè)線顯紫紅色(顯色與對(duì)照線*或更深),結(jié)果為陰性。
*檢測(cè)卡2 技術(shù)指標(biāo)
2.1 試劑卡靈敏度:1ppb(ng/ml)
對(duì)樣本的zui終檢測(cè)限須以試劑卡靈敏度乘以樣本處理的稀釋比例。
2.2 樣本檢測(cè)下限:
蜂蜜、組織、腸衣、肝臟………………………0.5ppb
3 試劑盒組成
檢測(cè)卡……………………50個(gè)/盒
樣本復(fù)溶液……………………1瓶
衍生化試劑……………………1瓶
說(shuō)明書(shū)…………………………1份
4 需要的器材和試劑
4.1 儀器:均質(zhì)器 、氮?dú)獯蹈裳b置、振蕩器、離心機(jī)、刻度移液管、天平(感量0.01g)
4.2 微量移液器:?jiǎn)蔚?0μl-200μl,100μl-1000μl
4.3試劑:乙酸乙酯、正己烷、氫氧化鈉、濃HCl、K2HPO4·3H2O
5 樣本前處理
5.1 樣本處理前須知:
實(shí)驗(yàn)器具必須潔凈并使用一次性吸頭,以避免污染干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
5.2 配液:
配液1:0.1M K2HPO4 溶液
稱11.4g K2HPO4?3H2O加去離子水溶解定溶至500ml。
配液2:1M HCL
8.6mL濃HCL加去離子水定容至100mL。
配液3:1M NaOH溶液
稱取4g NaOH,加去離子水定容至100ml
5.3蜂蜜、組織、腸衣、肝臟樣本處理方法
1)稱取2±0.05g均質(zhì)樣本于離心管中,加入4m去離子水、0.5 ml 1M 鹽酸溶液和100μl衍生化試劑,振蕩5分鐘;
2)在37℃過(guò)夜孵育(約16小時(shí))或50℃(超過(guò)50℃時(shí)會(huì)影響分層效果)水浴孵育3小時(shí);
3)分別加入5ml 0.1M K2HPO4 溶液,0.4ml 1M NaOH溶液和5ml的乙酸乙酯,振蕩5分鐘;
4)室溫下4000轉(zhuǎn)/分,離心10分鐘;
5)取出2.5ml的上層液到另一個(gè)離心管中,50-60℃氮?dú)饣蚩諝獯蹈桑?br>6)用1ml正已烷溶解殘留物,加入0.5ml復(fù)溶液充分振蕩混合30秒;室溫4000轉(zhuǎn)/分,離心10分鐘;
7)上層為正已烷,取下層樣本液用于分析。
濃縮倍數(shù)為:2 檢測(cè)下限:0.5ppb
6 實(shí)驗(yàn)步驟
6.1 撕開(kāi)檢測(cè)卡鋁箔包裝袋,取出檢測(cè)卡,放于平整、潔凈的臺(tái)面上。
6.2 用配套吸管吸取已準(zhǔn)備好的樣本液體,緩慢、逐滴的(應(yīng)避免泡沫產(chǎn)生)滴加2-3滴(約60ul)到加樣孔(S)內(nèi)。
6.3 室溫下放置3-5分鐘判斷結(jié)果, 其他時(shí)間判讀無(wú)效。
7 結(jié)果判斷
8 注意事項(xiàng)
8.1 過(guò)期或鋁箔袋破損的產(chǎn)品,均不可使用。
8.2 檢測(cè)卡從冰箱中取出時(shí)應(yīng)恢復(fù)到室溫后打開(kāi),打開(kāi)的檢測(cè)卡應(yīng)盡快使用以免受潮后失效。
8.3 不要觸摸檢測(cè)卡*的白色膜面。
8.4 取液滴管不可混用,以免交叉污染。
8.5 待檢樣品溶液需清亮、無(wú)混濁顆粒、無(wú)細(xì)菌污染,否則容易導(dǎo)致阻塞、顯色不明顯等異常現(xiàn)象,從而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的判定。
9 貯藏及保存期
儲(chǔ)藏條件:試劑盒于2-30℃干燥環(huán)境下保存。
保 質(zhì) 期:該產(chǎn)品有效期為1年,生產(chǎn)日期見(jiàn)包裝盒。
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