ELISA試劑盒直接包被的抗原經(jīng)固相抗體的親和層析效果，包被在固相上的抗原純度大大進(jìn)步，因而含雜質(zhì)較多的抗原也可選用捕獲包被法,實(shí)驗(yàn)的特異性、敏感性均由此得以改進(jìn)，重復(fù)性亦佳。蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是經(jīng)過(guò)物理吸附結(jié)合的，靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團(tuán)與固相載體外表的疏水基團(tuán)間的效果于。可將聚苯乙烯板先經(jīng)紫外線照耀（例如30W紫外燈，75cm照耀12小時(shí)），以增加其吸附性能。例如，在檢測(cè)抗DNA抗體時(shí)，需用DNA作為包被抗原，而遍及的固相載體一般不能直接與核酸結(jié)合。換言之，包被即是抗原或抗體結(jié)合到固相載體外表的進(jìn)程。當(dāng)抗原決定簇存在于或鄰近于疏水區(qū)域時(shí)，抗原與固相載體的直接吸附可使抗原決定簇不能充沛露出，在這種情況下，直接包被效果欠安，能夠選用直接的捕獲包被法，即先將針對(duì)該抗原的特異抗體作預(yù)包被，其后經(jīng)過(guò)抗原抗體反應(yīng)使抗原固相化。也可用親和素*體系作直接包被，即用親和素先包被載體，然后參加*化的DNA，這種包被辦法均勻、結(jié)實(shí)，已擴(kuò)展應(yīng)用于各種抗原物質(zhì)的定量測(cè)定。
ELISA試劑盒IgG對(duì)聚苯乙烯等固相具有較強(qiáng)的吸附力，其聯(lián)合多發(fā)生在Fc段上，抗體結(jié)合點(diǎn)露出于外，因而抗體的包被一般均選用直接吸附法。直接包被的另一長(zhǎng)處是抗原用量少，僅為直接包被的1/10乃至于/100，這種物理吸附對(duì)錯(cuò)特異性的，受蛋白質(zhì)的分子量、等電點(diǎn)、濃度等的影響，抗心磷脂抗體的ELISA試劑盒一般選用這種包被方式。固相載體先用堿性蛋白質(zhì)，如聚賴氨酸、*等作預(yù)包被，也可進(jìn)步核酸的結(jié)合力。
ELISA試劑盒脂類(lèi)物質(zhì)無(wú)法與固相載體結(jié)合，可將其在有機(jī)溶劑（例如乙醇）中溶解后參加ELISA板孔中，開(kāi)蓋置冰箱過(guò)夜或涼風(fēng)吹干，待酒精蒸發(fā)后，讓脂質(zhì)天然干固在固相外表。載體對(duì)不同蛋白質(zhì)的吸附才能是不相同的，大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)一般含有更多的疏水基團(tuán)，故更易吸附到固相載體外表。此直接結(jié)合在固相上的抗原遠(yuǎn)離載體外表，其抗原決定簇也得以充沛露出。
會(huì)員1.png)