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EISA試劑盒試驗必須遵循的三個核心原理

閱讀:121發(fā)布時間:2017-1-18

EISA試劑盒試驗有必要遵循以下3個中心原理:
(1)抗原或抗體能吸附于固相載體表面,并堅持其免疫學活性;
在實際操作中,除了選擇試劑外,有必要嚴峻按照操作過程進行操作,一同作好室內質控、室間質評,以慎重的工作作風查看每一份標本,才華確保查看質量。
如今國內已有恰當數(shù)量的單位具有全自動酶標儀,這關于完結ELISA標準化查看、前進查看質量起到了重要效果。
ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在臨床上得到了廣泛的運用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的查看效果影響較大,如不留意,有可能致使顯色不全、花板等結果。
(2)抗原或抗體可通過共價鍵與酶銜接構成酶聯(lián)絡物,而此種酶聯(lián)絡物仍能堅持其免疫學和酶學活性;
將血液先天然寄存1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:有必要運用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后有必要當即倒置*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內查看,可放在2-8℃冰箱中,若要儲存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
加樣后及時放入孵箱。
EISA試劑盒加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
假設選用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
標本較多時,請分批操作。
(3)酶聯(lián)絡物與相應抗原或抗體聯(lián)絡后,可根據(jù)參與底物的顏色反應來斷定是不是有免疫反應的存在,并且選用手藝洗板,孔與孔之間液體交叉。
選用半自動洗板機洗板時,洗液量缺少,致使洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,致使洗板效果差。
反應板過多造成洗板等待時間長。
確保洗液注滿各孔,洗板針疏通,洗完板后在吸水紙(選擇潔凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
顏色反應的深淺是與標本中相應抗原或抗體的量成正比例的,可根據(jù)已知濃度的抗原或抗體的顏色反應的深淺制造標準曲線并依此計算出不知道樣品中抗體或抗原的濃度。
EISA試劑盒實驗合理安排,或多用幾臺洗板機。


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