在ELISA試劑盒中通常有3次加樣步聚，即加標本，加酶聯絡物，加底物。加樣時應將所加物加在ELISA試劑盒板孔的底部，防止加在孔壁上部，并留意不行濺起，不行發生氣泡。加標本通常用微量加樣器，按規則的量參與板孔中。每次加標本應更換吸嘴，防止發生穿插污染，也可用一次性的定量塑料管加樣。在ELISA試劑盒中通常有3次加樣步聚，即加標本，加酶物，加底物。加樣時應將所加物加在ELISA試劑盒板孔的底部，防止加在孔壁上部，并留意不行濺起，不行發生氣泡。加標本通常用微量加樣器，按規則的量參加板孔中。每次加標本應更換吸嘴，避免發生穿插污染，也可用一次性的定量塑料管加樣。
ELISA試劑盒有此測定（如間接法ELISA試劑盒）需用稀釋的血清，可在試管中按規則的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中參加稀釋液，再在其間參加血清標本，然后在微型震動器上震動1分鐘以確保混和。加酶物運用液和底物運用液時可用定量多道加液器，在ELISA試劑盒中通常有兩次抗原抗體反響，即加標本和加酶物后。抗原抗體反響的完結需求有一定的溫度和時刻，這一保溫過程稱為溫育(incubation)，有人稱之為孵育，在ELISA試劑盒中似不恰當。
按ELISA試劑盒說明書的懇求準備試驗中需用的試劑。ELISA試劑盒頂用的蒸餾水或去離子水，包括用于洗滌的，應為新鮮的和高質量的。自配的緩沖液運用pH計測量較正。從冰箱中取出的試驗用試劑應待溫度與室溫平衡后運用。試劑盒中本次試驗不需用的有些應及時放回冰箱保存。
按ELISA試劑盒說明書的懇求準備試驗中需用的試劑。ELISA試劑盒頂用的蒸餾水或去離子水，包括用于洗刷的，應為新鮮的和高質量的。自配的緩沖液運用pH計測量較正。從冰箱中取出的試驗用試劑應待溫度與室溫平衡后運用。試劑盒中本次試驗不需用的有些應及時放回冰箱保存。
