酶聯(lián)免疫試劑盒在實(shí)驗(yàn)條件(包括試劑)較難保證恒定的情況下，這種判斷法較為合適。在得出標(biāo)本( S)和陰性對(duì)照(N)的A 值后，計(jì)算S/N 值。也有寫作P/N 的，這里的P 不代表陽性(positive)，而是病人(pati ent)的縮寫，不應(yīng)誤解。為避免混淆，更宜用S/N 表示。在早期的間接法酶聯(lián)免疫試劑盒中，酶聯(lián)免疫試劑盒有些作者定出S/N 為陽性標(biāo)準(zhǔn)，現(xiàn)多為各種測(cè)定所沿用。實(shí)際上每一測(cè)定系統(tǒng)應(yīng)該用實(shí)驗(yàn)求出各自的 S/N 的閾值。更應(yīng)注意的是，N 所代表的陰性對(duì)照是不含受檢物質(zhì)的人血清。有的試劑盒中所設(shè)陰性對(duì)照為不含蛋白質(zhì)或蛋白質(zhì)含量較底的緩沖液，以致反應(yīng)后產(chǎn)生的本底可能較正常人血清的本底低得多。
酶聯(lián)免疫試劑盒檢測(cè)中試劑的結(jié)果判斷之定性測(cè)定
定性測(cè)定的結(jié)果判斷是對(duì)受檢標(biāo)本中是否含有待測(cè)抗原或抗體作出 "有"或"無"的簡(jiǎn)單回答，分別用"陽性"、"陰性"表示。"陽性"表示該標(biāo)本在該測(cè)定系統(tǒng)中有反應(yīng)。"陰性"則為無反應(yīng)。用定性判斷法也可得到半定量結(jié)果，即用滴度來表示反應(yīng)的強(qiáng)度，其實(shí)質(zhì)仍是一個(gè)定性試驗(yàn)。在這種半定量測(cè)定中，將標(biāo)本作試劑的制備必須標(biāo)準(zhǔn)化，陽性和陰性的對(duì)照品應(yīng)符合一定的規(guī)格，酶聯(lián)免疫試劑盒須配用精密的儀器，并嚴(yán)格按規(guī)定操作。陽性判定值公式中的常數(shù)是在這特定的系統(tǒng)中通過對(duì)大量標(biāo)本的實(shí)驗(yàn)檢測(cè)而得到的。現(xiàn)舉某種檢測(cè) HBsAg 的試劑盒為例。
酶聯(lián)免疫試劑盒中的陰性對(duì)照品為不含HBsAg 的復(fù)鈣人血漿，陽性對(duì)照品HBsAg 的含量標(biāo)明為P=9±2ng /ml。每次試驗(yàn)設(shè)2 個(gè)陽性對(duì)照和3 個(gè)陰性對(duì)照。測(cè)得A 值后，先計(jì)算陰性對(duì)照A 值的平均數(shù)(NC X )和陽性對(duì)照A 值的平均數(shù)(PCX)，兩個(gè)平均數(shù)的差(P-N)必須大于一個(gè)特定的數(shù)值(例0.400)，試驗(yàn)才有效。3 個(gè)陰性對(duì)照 A 值均應(yīng)≥0.5×NCX，并≤1.5×NCX，如其中之一超出此范圍，則棄去，酶聯(lián)免疫試劑盒而已另兩個(gè)陰性對(duì)照重新計(jì)算NCX；如有兩個(gè)陰性對(duì)照A 值超出以上范圍，則該次實(shí)驗(yàn)無效。
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