ELISA試劑盒由于細菌感染而致病的各種標本及帶菌者所需檢查的各種標本，往往并非單一的細菌，而混有其它非致病菌（人體正常菌群）。因此當對此標本須作出細菌鑒定時，就必須從標本中分離出致病菌，稱為細菌分離培養技術。另外，對已得到可疑病菌進行細菌鑒定及菌種保存等培養，稱為純培養接種技術。
（一）平板劃線接種法（又稱分離培養法）
平板劃線接種法為zui常用的分離培養細菌的方法，通過平板劃線后，可使細菌分散生長，形成單個菌落，有利于從含有多種細菌的標本中分離出目的菌。平板分離劃線的方法較多，其中以分區劃線法與曲線劃線法較為常用。其目的都要使細菌呈現單個菌落生長，便于同雜菌菌落鑒別。現只介紹分區劃線法。
1、ELISA試劑盒右手持接種環，經火焰滅菌，待涼后，挑取大腸桿菌（或葡萄球菌）培養物少許。
2、左手斜持瓊脂平板，皿蓋留在桌上，于火焰近處將菌涂于瓊脂平板上端，來回劃線，涂成薄膜（約占平板總表面積的1/10），劃線時接種環與平板表面成30~40º角，輕輕接觸，以腕力在平板表面行輕快地滑移動作，接種環不應劃破培養基表面。
3、燒灼接種環，殺滅環上殘留細菌，待冷（是否冷卻，可先在培養基邊緣處試觸，若瓊脂溶化，表示未涼，稍等再試），從薄膜處取菌作連續平行劃線，約占平板表面1/5左右，再次燒灼接種環，等三次平行劃線……以同樣方法作第四次，第五次劃線，將平板表面劃完。
4、ELISA試劑盒劃線完畢，蓋上平皿蓋，底面向上，用標簽或臘筆注明菌名檢驗號碼，接種者信息等，置37℃孵育培養24小時后觀察結果。
