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ELISA檢測試劑盒對現(xiàn)代化的作用

閱讀：173發(fā)布時間：2015-3-31

ELISA檢測試劑盒原理采用雙抗體夾心ELISA法。實(shí)驗(yàn)時樣品或標(biāo)準(zhǔn)品與包被抗體結(jié)合，游離的成分被洗去。加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的抗體?？贵w與結(jié)合在包被抗體上的結(jié)合，游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB)，TMB在辣根過氧化物酶的催化下呈現(xiàn)藍(lán)色，加終止液后變成黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長處測OD值， LEP濃度與OD450值之間呈正比，通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣品中LEP的濃度。 
ELISA檢測試劑盒樣品收集、處理及保存方法

1.  血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2.  血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。
3.  細(xì)胞上清液：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4.  組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。
5.  保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

目前在ELISA檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)中較為常用的方法就是借助于ELISA試劑盒和相關(guān)的實(shí)驗(yàn)儀器進(jìn)行檢測，在一定程度上提升了實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性，更為經(jīng)濟(jì)實(shí)用，但是如果要具體到臨床檢測超低水平的蛋白，實(shí)驗(yàn)中所需用到的儀器并不便宜，也不是人人都承擔(dān)的起。


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