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閱讀:185發(fā)布時(shí)間:2014-12-30
在該研究中,研究人員比較了循環(huán)腫瘤細(xì)胞中基于血液KRAS突變分析和循環(huán)血漿DNA(用*進(jìn)行提取)ELISA試劑盒用于預(yù)測肺癌原發(fā)性腫瘤突變這兩種方法來替代組織活檢的可行性。
研究人員通過利用cobas4800(羅氏)等位基因特異性PCR技術(shù)檢測肺癌患者KRAS突變狀態(tài),該技術(shù)的原理是在基因組的某些非編碼區(qū),一些短的序列 ( 十幾至一百多個堿基 ) 可重復(fù)多次,并按照孟德爾遺傳法則呈共顯性遺傳。這種等位基因的多態(tài)性常達(dá)十個以上,因此這種遺傳標(biāo)記帶有很大的信息量。除了等位基因的遺傳多態(tài)性分析外,還應(yīng)用于點(diǎn)突變的檢測。
通常只需采集病人9ml血標(biāo)本就可以檢測,利用ScreenCell MB裝置捕獲循環(huán)腫瘤細(xì)胞,DNA通過人類組織和細(xì)胞*從循環(huán)腫瘤細(xì)胞中提取出。通過自定義設(shè)計(jì)的高分辨率溶解法檢測KRAS基因突變,并通過QIAGENELISA試劑盒進(jìn)行焦磷酸測序。
91例接受肺癌切除手術(shù)患者中,通過福爾馬林固定石蠟包埋(FFPE)進(jìn)行組織活檢的18例,通過外周血游離DNA檢測的17例,循環(huán)腫瘤細(xì)胞檢測的47例。研究發(fā)現(xiàn),ELISA試劑盒以血液為基礎(chǔ)檢測KRAS突變試驗(yàn)中,外周血游離DNA檢測的敏感度和特異度分別為81%、97%;循環(huán)腫瘤細(xì)胞檢測的敏感度和特異度分別為86%、38%。
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