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ELISA試劑盒經過*個保溫孵育期實驗步驟

閱讀:248發布時間:2014-12-10

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    該ELISA試劑盒的設計是基于運用兩個GLP-1特異性抗體與兩個位點結合的“雙位點夾心”技術。將標準品、質控品、和待測樣品加入鏈霉親和素包被的微孔板中。隨后,將*偶聯的GLP-1特異抗體和HRP標記的GLP-1特異抗體混合物添加到各個孔中。形成了“鏈霉親和素-*抗體- GLP-1(7-36)/(9-36)-HRP標記抗體”的“雙位點夾心”結構,ELISA試劑盒該復合體被微孔板的內壁吸附住。游離的HRP標記抗體和緩沖基質則在洗滌過程中被沖走。微孔板加入過氧化物酶基質并經過一段時間的反應后,然后用酶標儀測量吸光度。微孔板內壁的免疫復合體與GLP-1(7-36)/(9-36)的連接酶活性與樣本中的總GLP-1數量成正比。

酶免ELISA試劑盒實驗步驟:

1.將標準品、質控品和病人樣本添加到微孔中。

2.在各孔中添加100?L抗體混合物。

3.在2-8度的室溫下,靜置培養20-24小時。

4.用洗滌緩沖液稀釋液洗凈條帶。

5.在各孔中添加200 ?L的TMB基質。

6.室溫下靜置20分鐘。

7.添加50 ?L終止液。

8.讀取吸光度。

    ELISA試劑盒是專門用來定量檢測血漿樣本中的胰高血糖素樣肽的總濃度。哺乳動物的GLP-1肽鏈的基本氨基酸序列*相同,如:小鼠、大鼠、豬、狗、猴、人等。該ELISA試劑盒僅適用于科學研究。


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