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ELISA試劑盒試驗重復性差的原因剖析

閱讀:376發布時間:2017-10-12

1、ELISA試劑盒樣品數量不一,加樣時間長短不一
解決方法: 重復某一樣品時,加樣時間盡可能與*次接近
2、ELISA試劑盒樣品加入后未混勻
解決方法: 加樣后在混勻器上充分混勻
3、酶標儀濾光片不對或輸入波長不對
解決方法:TMB顯色用450/630波長
4、酶標儀測定重復性差
解決方法:校對酶標儀
5、洗滌不正確
解決方法:洗滌液注滿各孔但不要溢出。洗板時反應板面向下,垂直用力甩凈內容物(可多甩幾次),在干凈、無或少塵的吸水材料上拍干。洗板機洗板時不應有堵孔,洗滌應充分 
6、溫育條件不一致(一次用水育,一次用恒溫箱) 
解決方法:恒溫箱溫育較水浴顯色深, OD值高出0.1-0.15,均采用恒溫箱.如用水浴水溫應控制在37℃ 
7、不慎多加或少加酶或顯色劑 
解決方法:多加時顯色深,少加則淺,用記號筆圈上,便于分析 
8、閾值附近時陰時陽 
解決方法:同一樣品做三個復孔,以二個(含二個以上相同結果為準) 
9、ELISA試劑盒加樣量不足、保溫時間、洗滌條件一致 
盡可能使用同一移液器和裝緊吸嘴重復測定標本。條件、人員等應盡量與上次保持一致
 


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