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ELISA試劑盒工作原理分析及洗板方法

閱讀:401發布時間:2017-3-3

ELISA試劑盒使用定性夾心免疫檢查技能,用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條,這些多肽是我國型HEV毒株中心氨基酸序列中抗原性很強的肽段,分別來自于該毒株的開放閱讀框2和開放閱讀框3。
ELISA檢查試劑盒將樣品或規范品參加孔中并孵育,假如其間存在HEV IgM抗體,這些抗體就會與HEV 的多肽抗原,并固定在上面,洗板除掉其它非特異性抗體和樣品中的其它成份。

然后參加羊抗人IgM-HRP(辣根過氧化物酶)酶物,經第2次孵育后,酶物就會與*次孵育上的HEV IgM抗體相,ELISA試劑盒洗板除掉未的酶物,參加TMB底物溶液,在第三次孵育時會發作酶-底物反響,ELISA檢查試劑盒只有那些富含HEV IgM抗體和酶物所構成的復合物的孔才會發作色彩改變,參加硫酸溶液停止酶和底物間的反響,ELISA試劑盒并在波長: 450nm處丈量O.D.值,按照本HEV IgM抗體elisa試劑盒的測驗規范, O.D.值大于或等于Cut-Off值的樣品被認為是初試陽性。

ELISA檢查試劑盒洗板辦法有以下兩點。
手工洗板辦法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內的液體;在試驗臺上襯托幾層吸水紙,酶標板朝下用力拍幾回;將引薦的洗刷緩沖液zui少0.3ml寫入孔內,浸泡1-2分鐘,根據需要,重復此進程數次。
主動洗板:假如有主動洗板機,應在熟練使用后再用到正式試驗進程中。待檢樣本:體液、血清、血漿、細胞培養上清液、尿液、安排勻漿、心房水標本等。


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