糖酵解_磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶PEPC測試盒
測定方法：微量法
產品規格：100管/96樣
注 意：正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義：
PEPC（EC 4.1.1.31）廣泛存在于動物、植物、微生物和細胞中，是催化磷酸烯醇式丙酮酸與二氧化碳反應生成草酰乙酸呈不可逆反應的酶，對三羧酸循環的運轉起重要調節作用。
測定原理：
PEPC催化磷酸烯醇式丙酮酸和CO2生成草酰乙酸和HPO42-，蘋果酸脫氫酶進一步催化草酰乙酸和NADH生成蘋果酸和NAD+，在340nm測定NADH減少速率，計算PEPC活性。
糖酵解_磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶PEPC測試盒
需自備的儀器和用品：
紫外分光光度計/酶標儀、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制：
提取液：100mL×1瓶，4℃保存；
試劑一：液體15 mL×1瓶， 4℃保存；
試劑二：粉劑×2瓶，-20℃保存；
試劑三 ：原液10μL×1支，4℃保存；
試劑三：稀釋液5mL×1瓶，4℃保存；
樣本的前處理：
1、細菌或培養細胞：先收集細菌或細胞到離心管內，離心后棄上清；按照細菌或細胞數量（104個）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1mL提取液），超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
2、組織：按照組織質量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液），進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
3、血清（漿）樣品：直接檢測。
環保在線