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乳酸含量(LA)測試盒_糖酵解系列_分光光度法

參  考  價:面議
具體成交價以合同協議為準

產品型號50管/24樣

品牌

廠商性質經銷商

所在地上海市

更新時間:2022-07-26 14:17:58瀏覽次數:511次

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品牌 紀寧生物 貨期 現貨供應
有效期 6個月 用途 僅供科研實驗使用
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乳酸含量(LA)測試盒_糖酵解系列_分光光度法

測定方法:分光光度法

產品規格:50管/24樣

注   意 :正式測定之前選擇 2-3 個預期差異大的樣本做預測定。

測定意義:

乳酸是生物體代謝過程中重要的中間產物,與糖代謝、脂類代謝、蛋白質代謝及細胞內能量

代謝密切相關,乳酸含量是評估糖元代謝的和有氧代謝的重要指標。

乳酸含量(LA)測試盒_糖酵解系列_分光光度法

測定原理:

乳酸在乳酸脫氫酶的作用下生成丙酮酸,同時使NAD+還原生成NADH 和H+,H+傳遞給PMS

生成的 PMSH2 還原 INT 生成紅色物質,在 530nm 處有特征吸收峰。

自備實驗用品及儀器:

天平、研缽、離心機、可見分光光度計、1 mL 玻璃比色皿、恒溫水浴鍋。

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試劑組成和配制:

提取液:液體 55mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存。

試劑二:液體 12mL×1 瓶,4℃保存。

試劑三:粉劑×1 支,-20℃避光保存。臨用前加入 1.5mL 蒸餾水充分溶解。

試劑四:粉劑×1 瓶,4℃避光保存。臨用前加 15mL 蒸餾水充分溶解。

試劑五:粉劑×1 支,4℃避光保存。標準品:液體 1mL×1 支,4℃保存。

顯色液:臨用前根據用量按照提取液(V):試劑三(V):試劑四(V):試劑五(m)=1(mL): 0.3(mL):3(mL):15(mg)的比例充分混勻。(注意:現配現用,用多少配多少,在棕色瓶中配制,試劑盒中帶有 5 個棕色空瓶)

樣本處理:

1.    組織:按照質量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g,加入 1mL

提取液)加入提取液,冰浴勻漿后于 4℃,12000g 離心 10min,取上清測定。

2.    細胞:按照細胞數量(104 個):提取液體積(mL)為 500~1000:1  的比例(建議 500萬細胞加入 1mL 提取液),冰浴超聲波破碎細胞(功率 300w,超聲 3 秒,間隔 7 秒,總時間 3min);于 4℃,12000g 離心 10min,取上清測定。

3. 血清:直接測定。

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