組織無機(jī)磷含量測(cè)試盒_離子系列_分光光度法
測(cè)定方法：分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格：50管/48樣
注 意：正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
測(cè)定意義：
無機(jī)磷主要指磷酸根，參與生物體內(nèi)多種代謝，包括能量代謝、核酸代謝、蛋白質(zhì)磷酸化和脫磷酸化等等，此外促進(jìn)碳水化合物的合成、轉(zhuǎn)化和轉(zhuǎn)運(yùn)。
組織無機(jī)磷含量測(cè)試盒_離子系列_分光光度法
測(cè)定原理：
鉬藍(lán)與磷酸根生成660nm有特征吸收峰的物質(zhì)，通過測(cè)定660nm光吸收可計(jì)算無機(jī)磷含量。
自備儀器和用品：
可見分光光度計(jì)、離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液槍、1mL玻璃比色皿和蒸餾水。
試劑組成和配置：
試劑一：液體×1瓶，4℃保存。
試劑二：液體×1瓶，4℃保存。
試劑三：粉劑×1瓶，4℃避光保存。臨用前配制，加入20 mL蒸餾水，充分溶解后加入試劑二（全部），混勻。
標(biāo)準(zhǔn)品：液體×1支， 4℃保存。
無機(jī)磷提取：
按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL試劑一）進(jìn)行冰浴勻漿。10000rpm，4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。
測(cè)定：
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到660 nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 打開水浴鍋，調(diào)節(jié)溫度到40℃。
3. 空白管：取EP管，依次加入500μL蒸餾水，500μL試劑三，混勻后置于40℃水浴保溫10min，室溫冷卻10 min后于660 nm測(cè)定吸光度，記為A空白管。
4. 標(biāo)準(zhǔn)管：取EP管，依次加入50μL標(biāo)準(zhǔn)液，450μL蒸餾水，500μL試劑三，混勻后置于40℃水浴保溫10min，室溫冷卻10 min后于660 nm測(cè)定吸光度，記為A標(biāo)準(zhǔn)管。
5. 測(cè)定管：取EP管，依次加入50μL上清液，450μL蒸餾水，500μL試劑三，混勻后置于40℃水浴保溫10min，室溫冷卻10 min后于660 nm測(cè)定吸光度，記為A測(cè)定管。
注意：空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測(cè)定一次。
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