超氧陰離子OFR測試盒(氧化與抗氧化系列)
測定方法:分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣
注 意:正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。
測定意義:
生物體內(nèi)超氧陰離子等活性氧具有免疫和信號傳導的作用,但積累過多時會對細胞膜及生物大分子產(chǎn)生破壞作用,導致機體細胞和組織代謝異常,從而引起多種疾病。
超氧陰離子OFR測試盒(氧化與抗氧化系列)
測定原理:
超氧陰離子與鹽酸羥胺反應生成NO2-,NO2-在對氨基苯磺酸和α-萘胺的作用下,生成紅色的偶氮化合物,在530nm處有特征吸收峰,根據(jù)ΔA值可以計算樣品中O2-含量,反應式為NH2OH + 2O2- +H+ → NO2- + H2O2 + H2O。
自備實驗用品及儀器:
天平、水浴鍋、離心機、可見分光光度計、1 mL玻璃比色皿、氯仿和蒸餾水。
試劑組成和配制:
提取液:液體100mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:液體25mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:液體20mL×1瓶,4℃避光保存。
試劑三:液體20mL×1瓶,4℃避光保存。
試劑四:氯仿,自備。
超氧陰離子提取:
1.植物、動物組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液)進行冰浴勻漿,然后10000g,4℃,離心20min,取上清置于冰上待測。。
2.細菌、真菌:按照細胞數(shù)量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1mL提取液),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后10000g,4℃,離心20min,取上清置于冰上待測。
3.血清或培養(yǎng)液:直接測定。