氧化與抗氧化系列_總巰基測(cè)試盒
測(cè)定方法：微量法
產(chǎn)品規(guī)格：100管/48樣
注 意 ：正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
測(cè)定意義：
生物體內(nèi)巰基主要包括GSH巰基和蛋白質(zhì)巰基。前者不僅能夠修復(fù)氧化損傷的蛋白質(zhì)，而且參與活性氧清除，后者對(duì)于維持蛋白質(zhì)構(gòu)象具有重要作用。通過(guò)測(cè)定總巰基含量和GSH含量，能夠間接測(cè)定蛋白質(zhì)巰基含量。
氧化與抗氧化系列_總巰基測(cè)試盒
測(cè)定原理：
巰基基團(tuán)與5,5’-二硫代-雙-硝基苯甲酸（DTNB）反應(yīng)，生成化合物，在412nm處有大吸收峰。
自備實(shí)驗(yàn)用品：
天平、研缽、恒溫水浴鍋、酶標(biāo)儀、96孔板、乙醇和蒸餾水。
試劑組成和配制：
試劑一：液體18mL×1瓶，4℃保存。
試劑二：液體1mL×1管，4℃避光保存。
樣品的制備：
1.按照組織質(zhì)量（g）：水體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL蒸餾水）進(jìn)行冰浴勻漿，然后8000g，4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。
2.血清，培養(yǎng)液：稀釋5倍后測(cè)定，可取0.1mL樣本，加入0.4mL蒸餾水，混勻，置冰上待測(cè)。
操作步驟：
1、酶標(biāo)儀預(yù)熱30min，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至412nm。
2、操作表
在96孔板中加入如下試劑
對(duì)照管測(cè)定管
樣品（μL）4040
試劑一（μL）150150
試劑二（μL）10
乙醇（μL）10
混勻，25℃靜置10min，測(cè)定412nm吸光值。ΔA=A測(cè)定-A對(duì)照。每個(gè)測(cè)定管設(shè)一個(gè)對(duì)照管。
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