羥甲基戊二酰COA合成酶HMGCS測試盒分光法
測定方法：分光光度法
產品規格：50管/48樣
注 意：正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義：
羥甲基戊二酰COA合成酶是甲羥戊酸代謝途徑中的關鍵酶，催化乙酰CoA與乙酰乙酰CoA生成羥甲基戊二酰CoA。
羥甲基戊二酰COA合成酶HMGCS測試盒分光法
測定原理：
HMGCS催化乙酰CoA與乙酰乙酰CoA生成羥甲基戊二酰CoA，同時產生CoASH，使DTNB轉化為的TNB，在412nm下有特征吸光值。
所需的儀器和用品：
可見分光光度計、臺式離心機、可調式移液器、1 mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制：
提取液：60mL×1瓶，4℃保存。
試劑一：粉劑×1瓶，-20℃避光保存；臨用前加入7mL蒸餾水充分溶解待用；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復凍融；
試劑二：粉劑×1瓶，-20℃避光保存；臨用前加入7mL蒸餾水充分溶解待用；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復凍融；
試劑三：15mL×1瓶，4℃避光保存。
樣本測定的準備：
1、細菌、細胞或組織樣品的制備：
細菌或培養細胞：先收集細菌或細胞到離心管內，離心后棄上清；按照細菌或細胞數量（104個）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1mL提取液），超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
組織：按照組織質量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液），進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
2、血清（漿）樣品：直接檢測。
測定步驟：
1、分光光度計預熱30min以上，調節波長至412nm，蒸餾水調零。
2、在1 mL玻璃比色皿中加入125μL試劑一、125μL試劑二和250μL試劑三，混勻，加入500μL樣本上清，迅速混勻后記錄412nm下初始吸光值A1和4min后的吸光值A2。計算ΔA＝A2-A1。
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