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上海紀寧實業(yè)有限公司

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其它系列_莽草酸脫氫酶(SD)測試盒

參  考  價:面議
具體成交價以合同協(xié)議為準

產(chǎn)品型號100管/96樣

品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所在地上海市

更新時間:2022-07-29 10:23:55瀏覽次數(shù):632次

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品牌 紀寧生物 貨期 現(xiàn)貨供應
有效期 6個月 用途 僅供科研實驗使用
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其它系列_莽草酸脫氫酶(SD)測試盒

測定方法:微量法

產(chǎn)品規(guī)格:100管/96樣

注    意: 正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定

測定意義:                           

莽草酸途徑是存在于植物、真菌和微生物中的一條重要的代謝途徑,莽草酸脫氫酶是莽草酸合成途徑中的關(guān)鍵酶。

其它系列_莽草酸脫氫酶(SD)測試盒

測定原理:

莽草酸脫氫酶催化莽草酸和NADP產(chǎn)生NADPH,檢測340nm下的吸光值增加速率來表示SD活性。

需自備的儀器和用品:

紫外分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

試劑組成和配制:

提取液:液體100mL×1瓶,4℃保存;

試劑一:液體25mL×1瓶,4℃保存;

試劑二:粉劑×2瓶,4℃保存;

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粗酶液提取:

細菌或培養(yǎng)細胞:先收集細菌或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細菌或細胞數(shù)量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1mL提取液),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

測定步驟:

1、分光光度計或酶標儀預熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至340nm,蒸餾水調(diào)零。

2、樣本測定

(1)在試劑二中加入10mL試劑一充分溶解混勻,置于37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)水浴5min,現(xiàn)配現(xiàn)用。

(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL樣本和190μL試劑二,混勻,立即記錄340nm處20s時的吸光值A(chǔ)1和 5min20s后的吸光值A(chǔ)2,計算ΔA=A2-A1。

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