肉桂醇脫氫酶(CAD)測試盒_其它系列
測定方法：分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格：50管/48樣
注 意 ：正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定意義：
CAD是木質(zhì)素生物合成途徑中的關(guān)鍵酶之一，是木質(zhì)素單體合成反應(yīng)中的后一步，催化多種不同的肉桂醛（香豆醛、芥子醛以及松柏醛等）生成與之相應(yīng)的肉桂醇。該酶多存在于高等植物、酵母、菌類中，研究該酶可以探討多種生物細胞發(fā)育過程中木質(zhì)素沉積的代謝機理，為減少水果石細胞含量提高其品質(zhì)提供依據(jù)。
肉桂醇脫氫酶(CAD)測試盒_其它系列
測定原理：
CAD催化肉桂醇和NADP生成肉桂醛和NADPH，在340nm下測定NADPH生成速率，即可反映CAD活性。
需自備的儀器和用品：
紫外分光光度計、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制：
提取液：液體60mL×1瓶，4℃保存；
試劑一：液體60mL×1瓶， 4℃保存；
試劑二：粉劑×2瓶，-20℃保存；
粗酶液提取：
細菌或培養(yǎng)細胞：先收集細菌或細胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細菌或細胞數(shù)量（104個）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1mL提取液），超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液），進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
測定步驟：
1、分光光度計預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至340nm，蒸餾水調(diào)零。
2、樣本測定
（1）在試劑二中加入25mL試劑一充分溶解混勻，室溫使用渦旋振蕩儀振蕩溶解15min，如未溶解可適當延長振蕩時間；置于37℃（哺乳動物）或25℃（其它物種）水浴5min；現(xiàn)配現(xiàn)用（配好后24h內(nèi)用完）；
（2）在1mL石英比色皿中加入50μL樣本和950μL試劑二，混勻，立即記錄340nm處初始吸光值A(chǔ)1和 5min后的吸光值A(chǔ)2，計算ΔA=A2-A1。
環(huán)保在線