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蛋白-含量系列_考馬斯亮藍法蛋白含量測試盒

參  考  價:面議
具體成交價以合同協議為準

產品型號100管/96樣

品牌

廠商性質經銷商

所在地上海市

更新時間:2022-07-29 14:48:34瀏覽次數:902次

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品牌 紀寧生物 貨期 現貨供應
有效期 6個月 用途 僅供科研實驗使用
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蛋白-含量系列_考馬斯亮藍法蛋白含量測試盒

測定方法:微量法

產品規格:100管/96樣

注    意:正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。

測定意義:

樣品可溶性蛋白質含量常常用于酶活性計算。此外,可溶性蛋白質含量也用于食品等質量分析。

蛋白-含量系列_考馬斯亮藍法蛋白含量測試盒

測定原理:

在酸性溶液中,考馬斯亮藍G-250與蛋白質結合形成藍色復合物;該復合物在620nm處有大吸收峰, 其顏色的深淺與蛋白質的濃度成正比。該方法靈敏度高,適合微量蛋白質分析。

自備儀器和用品:

離心機、酶標儀、96孔板、移液器和蒸餾水。

試劑組成和配制:

試劑一:液體11 mL×1瓶,4℃保存。

樣品中可溶性蛋白質提取:

1.液體樣品:澄清液體樣品可以直接測定。

2.組織樣品:按照組織質量(g):提取液體積(mL)為1:20的比例(建議稱取約0.05 g組織,加入1mL提取液(自備,根據需要選用酶提取緩沖液或者蒸餾水或者生理鹽水))

冰浴勻漿,8000g,4℃離心10min,取上清,即待測液。(動物樣品常常需要稀釋)

3.細菌、真菌:按照細胞數量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1mL提取液),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后8000g,4℃,離心10min,取上清置于冰上待測。

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計算公式:

標準曲線:y = 7.1265x - 0.0007  R2 = 0.9997    x: 蛋白標準品濃度(mg/mL)

                                                 y: 吸光值差值

1.按液體樣本體積計算:


Cpr(mg/mL)=(△A+0.0007)÷7.1265

                                 =0.1403×(△A+0.0007)

2.按組織樣本質量計算:

                    Cpr(mg/g)=(△A+0.0007)÷7.1265×V總÷W            

=0.1403×(△A+0.0007)÷W

V總:提取液體積,1 mL; W:樣本質量,g。

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