幾丁質酶測試盒_糖代謝系列
測定方法:分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格:50管/24樣
注 意:正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。
測定意義:
幾丁質主要存在于蝦、蟹、昆蟲等甲殼類動物的外殼與軟體動物的器官(例如烏賊的軟骨),以及真菌類的細胞壁中。而幾丁質酶(EC 3.2.1.14)可催化幾丁質水解,具有抵御真菌侵染的作用,成為抗真菌病害的研究熱點。
測定原理:
幾丁質酶水解幾丁質產(chǎn)生N-乙酰氨基葡萄糖,進一步與對二甲氨基苯甲-醛產(chǎn)生紅色化合物,在585nm處有特征吸收峰,吸光值增加速率反映了幾丁質酶的活性。
幾丁質酶測試盒_糖代謝系列
自備實驗用品及儀器:
天平、水浴鍋、離心機、可見分光光度計、1 mL玻璃比色皿,蒸餾水。
試劑組成和配制:
提取液:液體100mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:液體10mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:液體10mL×1瓶,4℃保存。(若出現(xiàn)結晶,可80℃左右加熱溶解后使用)
試劑三:液體10mL×1瓶,4℃保存。
試劑四:液體20mL×1瓶,4℃避光保存。
粗酶液提取:
1.組織:按照組織質量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液)進行冰浴勻漿,然后10000g,4℃離心20min,取上清,置冰上待測。
2.真菌:按照細胞數(shù)量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1mL提取液),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后10000g,4℃,離心20min,取上清置于冰上待測。
3.培養(yǎng)液:直接測定。