人登革熱抗體(DF-Ab)ELISA Kit說明書

酶標試劑盒操作中出現的問題：現象、可能原因和解決辦法：
1、 不同廠家生產的試劑盒因生產工藝和操作方法略有不同，務必按照所用試劑盒嚴格操作，否則容易產生檢測結果的不確定性.
2、 若不同批號試劑的不同組分（A液或酶工作液），或不同試劑的不同組分進行交叉使用，有可能出現顯色淺或本底高，花板等情形。
3、 加樣時樣品量誤差，對于陰或很陽的標本影響不大，但對閾值附近的標本影響*，建議校對加樣器。
4、 反應時間的誤差，做大量標本時，*孔和zui后一孔以及一些特殊標本可能影響較大。
5、 由于滴瓶的精密性肯定不如加樣器，不排除不同滴頭滴量的誤差。另外滴加過程中是否產生氣泡、速度是否均勻，是否顫動等影響液量的因素均可導致以上情況。高標準要求時應使用加樣器。
6、 閾值附近實際上是個灰區（gray scale）,不能截然分為陰性、陽性，國外廠家均要求對這部分可疑標本進行奇數次復檢，以次數多者為準，如一次陽兩次陰zui后判為陰，但實際上是否為陰不好說，只有判為可疑，臨床上可以讓患者過一段時間后再測。
7、 肉眼觀察稍顯色，酶標儀打印為陰性的標本在實際工作中是難以避免的，肉眼目測結果不可靠，應以酶標儀判讀為準。
8、 由陰性變為強陽性原因多為操作過程中漏加試劑等有關。
9、 臨界值附近標本波動為正常現象，任何試劑均不可避免。可以考慮將標本做奇數次復檢。

人登革熱抗體(DF-Ab)ELISA Kit說明書

Elisa相關小常識： 

酶與底物   酶結合物是酶與抗體或抗原, 半抗原在交聯劑作用下聯結的產物。是ELISA成敗的關鍵試劑，它不僅具有抗體抗原特異的免疫反應，還具有酶促反應，顯示出生物放大作用，但不同的酶選用不同的底物。

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