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人抗天然脫氧核糖核酸抗體(n-DNA-Ab)ELISA Kit說明書

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更新時間:2018-05-18 21:19:51瀏覽次數:218次

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人抗天然脫氧核糖核酸抗體(n-DNA-Ab)ELISA Kit說明書


ELISA小常識:ELISA試驗條件固相載體的選擇:載體的種類比較多,其中包括纖維素、交聯右旋糖酐、葡萄球菌聚苯乙烯、聚丙烯酰胺等。從使用形式上可有凹孔平板、試管、珠粒等。聚苯乙烯凹孔板是應用zui廣泛的一種載體。聚苯乙烯塑料微量滴定板吸附蛋白的性能好,操作簡便、用量小,適于大批檢查。由于聚苯乙烯的工藝過程不是很穩定,造成各批次差異比較大。所以進行ELISA之前,必須進行篩選。檢查方法:⑴ 吸附性能的檢查:先加抗體包被,然后加入同一稀釋度的酶標抗體,zui后加底物、顯色、測OD值,求出總平均OD值,再求出每相鄰兩孔的OD平均值,此均值在總均值的±10%以內為合格,若中間孔與四周孔OD值相差太大,或一側與另一側孔OD值相差較大均屬不合格。⑵ 對比測定陽性血清與陰性血清,觀察是否存在明顯差異,若二者OD值相差于10倍以上者為合格。板的處理。新板一般不用處理,用蒸餾水沖洗即可應用。板用一次即廢。但不少實驗工作者認為用超聲波處理,清潔液Tritonx100、20%乙二醇處理仍可應用。但發現空白對照顯色較深和陽性樣品顯色結果不理想時,應放棄不用。


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ELISA試劑盒所需要樣本處理及要求
血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。
2. 血漿:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右 (2000-3000轉/分)去除顆粒。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。


人抗天然脫氧核糖核酸抗體(n-DNA-Ab)ELISA Kit說明書

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