人抗浦肯野細(xì)胞抗體/抗Yo抗體(PCA-1/Yo)ELISA Kit說(shuō)明書(shū)
ELISA小常識(shí):ELISA試驗(yàn)條件固相載體的選擇:載體的種類比較多,其中包括纖維素、交聯(lián)右旋糖酐、葡萄球菌聚苯乙烯、聚丙烯酰胺等。從使用形式上可有凹孔平板、試管、珠粒等。聚苯乙烯凹孔板是應(yīng)用zui廣泛的一種載體。聚苯乙烯塑料微量滴定板吸附蛋白的性能好,操作簡(jiǎn)便、用量小,適于大批檢查。由于聚苯乙烯的工藝過(guò)程不是很穩(wěn)定,造成各批次差異比較大。所以進(jìn)行ELISA之前,必須進(jìn)行篩選。檢查方法:⑴ 吸附性能的檢查:先加抗體包被,然后加入同一稀釋度的酶標(biāo)抗體,zui后加底物、顯色、測(cè)OD值,求出總平均OD值,再求出每相鄰兩孔的OD平均值,此均值在總均值的±10%以內(nèi)為合格,若中間孔與四周孔OD值相差太大,或一側(cè)與另一側(cè)孔OD值相差較大均屬不合格。⑵ 對(duì)比測(cè)定陽(yáng)性血清與陰性血清,觀察是否存在明顯差異,若二者OD值相差于10倍以上者為合格。板的處理。新板一般不用處理,用蒸餾水沖洗即可應(yīng)用。板用一次即廢。但不少實(shí)驗(yàn)工作者認(rèn)為用超聲波處理,清潔液Tritonx100、20%乙二醇處理仍可應(yīng)用。但發(fā)現(xiàn)空白對(duì)照顯色較深和陽(yáng)性樣品顯色結(jié)果不理想時(shí),應(yīng)放棄不用。
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ELISA小常識(shí):
抗HIV-ELISA試劑目前對(duì)HIV的檢測(cè)原料有了較大改進(jìn),主要如下:
(1)可用于檢測(cè)血清或血漿中HIV IgM亞特異性抗體和檢測(cè)HIV-1、2和多種亞型。
(2)標(biāo)記的抗原:a.含HIV-1B亞型gp41和P24的HIV-1重組融合蛋白。b.可特異性檢測(cè)血清或血漿中HIV M群的抗體,絕大多數(shù)HIV-1.0群和HIV-2群的抗體。c.gp36免疫調(diào)控區(qū)的HIV-2多肽可測(cè)定特異性的HIV-2抗體。d.gp41的倆段HIV 1.0群多肽,可測(cè)特異性HIV 1.0 群的抗體 和HIV 1M群的抗體。HIV-1.0.2對(duì)759份各類臨床樣品包括401份HIV-1感染不同階段病人樣品,204分HIV-2感染不同階段病人樣品,和154份與HIV無(wú)關(guān)的其他疾病患者的樣品的檢測(cè)結(jié)果。特異性:99.93% 靈敏度:*
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