人纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA試劑盒
實(shí)驗(yàn)原理
用純化的抗原包被微孔板,制成固相載體,往包被抗原的微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、*化的抗原、HRP標(biāo)記的親和素,經(jīng)過*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的指標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。
人纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA試劑盒
分析前質(zhì)控
●人員培訓(xùn) 實(shí)驗(yàn)是人操作的,因此檢驗(yàn)人員需經(jīng)過培訓(xùn),熟練掌握本專業(yè)如下幾方面的技術(shù)知識:
◎檢驗(yàn)項(xiàng)目的基本原理 (ELISA原理);
◎臨床意義;
◎熟悉檢測技巧,了解易出差錯的環(huán)節(jié)及難點(diǎn);
◎熟悉檢測試劑性能(包括試劑盒組成,包被片段及其組成);
◎ 熟悉檢測儀器的原理及性能;掌握數(shù)據(jù)處理的能力和質(zhì)量控制知識。
◎某些特殊項(xiàng)目的檢測如抗HIV等需經(jīng)有關(guān)部門組織的專門培訓(xùn)班,考試合格后持證上崗。
分析前質(zhì)控
◎ELISA原理:1971年Engvall等人把免疫組化的EIA技術(shù)應(yīng)用于臨床檢驗(yàn)發(fā)展為ELISA技術(shù)。
特點(diǎn) :在固相表面組裝免疫活性物質(zhì)形成"免疫吸附劑"
酶標(biāo)記免疫活性物質(zhì),進(jìn)行信號放大;
有二步溫育反應(yīng)二次洗滌過程;
靈敏度特異性相對較高。
局限性:只能檢測到ng水平
精密度差(批內(nèi)CV15-20%);
線性范圍窄(一個數(shù)量級);
存在"HD-HOOK"效應(yīng)。
人纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA試劑盒
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