人乳腺癌易感蛋白2(BRCA-2)ELISA試劑盒價格
北京方程生物與人乳腺癌易感蛋白2(BRCA-2)ELISA試劑盒價格有關的ELISA知識之雙抗體夾心法
雙抗體夾心法是檢測抗原zui常用的方法,操作步驟如下:
1) 將特異性抗體與固相載體聯結,形成固相抗體。洗滌除去未結合的抗體及雜質。
2) 加受檢標本,保溫反應。標本中的抗原與固相抗體結合,形成固相抗原抗體復合物。
洗滌除去其他未結合物質。
3) 加酶標抗體,保溫反應。固相免疫復合物上的抗原與酶標抗體結合。*洗滌未結合
的酶標抗體。此時固相載體上帶有的酶量與標本中受檢抗原的量相關。
4) 加底物顯色。固相上的酶催化底物成為有色產物。通過比色,測知標本中抗原的量。
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合成多肽抗原是根據蛋白質抗原分子的某一抗原決定簇的氨基酸序列人工合成的多肽片段。多肽抗原一般只含有一個抗原決定簇,純度高,特異性也高,但由于分子量太小,往往難于直接吸附于固相上。多肽抗原的包被一般需先使其與無關蛋白質如牛血清白蛋白質(BSA)等偶聯,借助于偶聯物與固相載體的吸附,間接地結合到固相載體表面。應用多肽抗原的另一注意點為他僅能檢測與其相應的抗體。一種蛋白質抗原往往含有多個不同的能引起抗體產生的決定簇,因此在受檢血清中的其他抗體就不能與該多肽抗原發生反應。另外,某些微生物發生變異時往往發生抗原結構變化,在這種情況下,用個別多肽抗原進行包被可引起其他抗體的漏檢。
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