人補體7(C7)ELISA Kit代測
ELISA小常識:
間接法是檢測抗體zui常用的方法,其原理為利用酶標記的抗抗體以檢測已與固相結合的受檢抗體,故稱為間接法。操作步驟如下:(1)將特異性抗原與固相載體連接,形成固相抗原(2)加稀釋的受檢血清:其中的特異抗體與抗原結合,形成固相抗原抗體復合物。(3)加酶標抗抗體:與固相復合物中的抗體結合,從而使該抗體間接地標記上酶。(4)加底物顯色:顏色深度代表標本中受檢抗體的量。
人補體7(C7)ELISA Kit代測
酶標試劑盒操作中出現的問題:現象、可能原因和解決辦法:
1、 不同廠家生產的試劑盒因生產工藝和操作方法略有不同,務必按照所用試劑盒嚴格操作,否則容易產生檢測結果的不確定性.
2、 若不同批號試劑的不同組分(A液或酶工作液),或不同試劑的不同組分進行交叉使用,有可能出現顯色淺或本底高,花板等情形。
3、 加樣時樣品量誤差,對于陰或很陽的標本影響不大,但對閾值附近的標本影響*,建議校對加樣器。
4、 反應時間的誤差,做大量標本時,*孔和zui后一孔以及一些特殊標本可能影響較大。
5、 由于滴瓶的精密性肯定不如加樣器,不排除不同滴頭滴量的誤差。另外滴加過程中是否產生氣泡、速度是否均勻,是否顫動等影響液量的因素均可導致以上情況。高標準要求時應使用加樣器。
6、 閾值附近實際上是個灰區(gray scale),不能截然分為陰性、陽性,國外廠家均要求對這部分可疑標本進行奇數次復檢,以次數多者為準,如一次陽兩次陰zui后判為陰,但實際上是否為陰不好說,只有判為可疑,臨床上可以讓患者過一段時間后再測。
7、 肉眼觀察稍顯色,酶標儀打印為陰性的標本在實際工作中是難以避免的,肉眼目測結果不可靠,應以酶標儀判讀為準。
8、 由陰性變為強陽性原因多為操作過程中漏加試劑等有關。
9、 臨界值附近標本波動為正常現象,任何試劑均不可避免。可以考慮將標本做奇數次復檢。
人補體7(C7)ELISA Kit代測
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