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白細胞介素-2(interleukin-2;IL-2 )

時間:2015-7-27閱讀:140
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其他名稱:T細胞生長因子(T cell growth factor,TCRF) 

定義:主要由活化的CD4+T細胞和CD8+T細胞產生的具有廣泛生物活性的細胞因子。是所有T細胞亞群的生長因子,并可促進活化B細胞增殖,故為調控免疫應答的重要因子,也參與抗體反應、造血和腫瘤監視。 

【中文名稱】: 白細胞介素-2 

【簡寫拼音】: BXBJS-2 

【英文名稱】: Interleukin-2 

【所屬類別】: 免疫增強劑||其他抗腫瘤藥及輔助治療藥 

【別名】 白間素, 欣吉爾, T細胞生長因子 ,白細胞介素-2 

【外文名】Interleukin-2 ,IL-2 

【適應癥】 白介素-2是一個分子量為14500的糖蛋白,它刺激已被特異性抗原或致絲裂因數啟動的T細胞增殖。重組白介素-2可用于臨床研究。主要用于腎癌、黑色素瘤和非何杰金淋巴瘤有效(Rossenberg)。LAK細胞代表1個有單核巨噬細胞,B和T淋巴細胞特征的異原的細胞體。這些LAK細胞似乎對癌細胞有特異作用。此外,LAK細胞(不象T細胞)介導殺傷不受MHC的約束。[1] 

1 材料和方法:

  1.1 制備粗制IL-2無菌采血,肝素抗凝,用RPMI1640按1∶1將血液稀釋,然后重層于菲可液面上,以1 500r/min離心30min,取白細胞層,用RPMI1640洗2次,按1~3×10細胞/ml濃度加入10%胎牛血清RPMI1640,注入一裝有磁棒的大瓶中,置37℃攪拌培養4天,取出,分裝于50ml離心管中,1 500r/min離心20min,棄上清液,將細胞懸浮于1%胎牛血清RPMI1640培養液中,使細胞濃度為106細胞/ml。同時加入純質PHA1~2μg/ml以及多種B淋巴母細胞株,使其濃度為106細胞/ml,37℃攪拌培養18~24h后,取出以1500r/min離心30min,取上清,用045μg濾膜過濾除菌,濾液即為粗制IL-2。 

 2 制備精品IL2 

  2.1 硫酸銨沉淀與真空濃縮透析:在4℃下將硫酸銨粉末按50%飽和量加入上述粗制IL-2中,攪拌2h,12000g離心30min,取上清液,再加入80%飽和硫酸銨,4℃過夜,次日以12000g離心30min,棄上清液,將沉淀溶于1% PEG 6 000的1∶2 PBS溶液(pH值73)中,置真空負壓濃縮*中透析濃縮至所需容量。 

  2.2 Sephadex G100凝膠過濾:用2×180cm的過濾柱及PBS(同上),以80ml/h流速過濾。將各管洗脫液用紫外分光光度計280nm檢測其OD值。同時將幾種不同分子量的標準蛋白也用相同條件過濾及檢測其OD值,繪出IL-2及標準蛋白OD值的曲線。將各管洗脫液過濾除菌后,作白細胞生物活性試驗,按試驗結果繪出曲線,找出具有zui高IL2活性的幾管洗脫液,混合后,作下一步精制。 

  2.3 BlueSepharose層析:將上述混合后的洗脫液加入BlueSepharose柱中,流速約15ml/h,按每管10ml收集流出液,當樣品全部流出柱中以后,用上述PBS洗滌樣品柱,再用梯度NaCl溶液(從0075mol/L至06mol/L NaCl的PBS溶液)洗脫,按2ml/管收集洗脫液。NaCl 溶液梯度及流速均由梯度混合器調節控制。洗脫完畢后,作各管OD值及NaCl濃度的測定。各管洗脫液過濾除菌后,作出生物活性測定。將峰值前后的數管洗脫液混合,即為精制的IL2。置-20℃冰箱保存。 

  3 檢定 

  3.1 活性測定用10%胎牛血清RPMI1640將上述IL2稀釋為50%、25%、125%、625%,而后再將每個百分濃度以及*濃度的IL2倍比稀釋,自1∶2至1∶128,將每個稀釋度分別加入多孔板的孔中,每孔01ml。然后取CT6細胞株(小鼠的IL2依賴性T細胞株),調整濃度為106細胞/ml,每孔加入01ml,同時用培養基代替IL2作對照。將多孔板培養24h后,取出按每孔1μci的濃度加H3標記胸腺嘧啶核苷繼續培養4h。取出后用MESHⅡ細胞收集器過濾洗滌細胞,用β計數器測定各孔細胞的cpm。必要時按此結果繪出曲線,確定活性單位。 

  3.2 蛋白含量測定采用分光光度計,分別測得OD280及OD260,然后按下式計算:蛋白含量(mg/ml)=(144×OD280-075×OD260)×稀釋倍數 

  3.3 毒性試驗及細菌檢查參考*制備部分。 

應用

【藥理作用】 本品可促進T淋巴細胞增殖與分化,誘導具有細胞毒樣活力的殺傷細胞,誘導及增強殺傷性T細胞、單核細胞、巨噬細胞的活力等。 

【臨床應用】 適用于慢性活動性乙型肝炎病毒感染等 

【用法用量】 靜脈滴注:每次2.5萬-5萬U,每日1次。 

【不良反應】 常見發熱、寒戰等反應。1.消化系統:惡心、嘔吐、腹瀉、結腸局部壞死或穿孔。 2.呼吸系統:可致間質性肺水腫、呼吸性堿中毒。3.神經系統:可發生行為變化、認知障礙。4.心血管系統:可出現低血壓、心動過速、心律失常等癥狀。5.血液系統:可出現中性粒細胞上升,淋巴及單核細胞下降。6.泌尿系統:出現少尿、體液潴留、氨質血癥。可出現內分泌功能紊亂,血鈣、血磷下降,*缺乏。 

【規格】 粉針劑:1000u,10000u, 10萬u, 100萬u. 

注意事項:癲癇、嚴重低血壓,心、腎功能不全,高熱者禁用。孕婦、患有心臟病或肺部疾病、60歲以上者慎用。用藥期間應定期查肝、腎功能。



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產品:

bs-7741R細胞周期調控因子10抗體|CDC10
bs-7743R中心體蛋白97kDa抗體|CEP97
bs-7740R卷曲螺旋結構域蛋白11抗體|CCDC11
bs-7742R中心體蛋白55kDa抗體|CEP55
bs-8184R富含半*與表皮生長因子樣蛋白2抗體|AVSD2
bs-7745R細胞骨架相關蛋白2/腫瘤和微管相關蛋白抗體|CKAP2
bs-7744R染色質修飾蛋白4B(4C)抗體|CHMP4B+CHMP4C
bs-3032R磷酸化非受體*激酶c-Abl抗體|phospho-c-Abl (Tyr412)
bs-3041R磷酸化非受體*激酶c-Abl抗體|phospho-c-Abl (Tyr226)
bs-3042R磷酸化非受體*激酶c-Abl抗體|phospho-c-Abl (Tyr185)
bs-5053R酪蛋白激酶1γ2抗體|CSNK1G2
bs-2389R柯薩奇病毒蛋白受體B抗體|Coxsackie Adenovirus Receptor
bs-5996R腫瘤抑制因子FBW7抗體|CDC4
bs-5997R細胞粘附分子4抗體|Cell adhesion molecule 4
bs-5995R鈣調蛋白結合轉錄激活因子1抗體|CAMTA1
bs-6518R周期素依賴性激酶5激活結合蛋白C53抗體|CDK5RAP3
bs-6519R著絲粒蛋白H抗體|CENPH
bs-6042R半*蛋白酶抑制劑6抗體|Cystatin E
bs-6024R碳酸酐酶相關蛋白/腦蛋白10抗體|CA10
bs-2615R白細胞介素-18受體α鏈抗體|IL-18R alpha/CD218a
bs-3778R轉錄阻抑蛋白CTCF抗體|CTCF
bs-3786RT淋巴細胞CD1抗體|CD1a
bs-4000R磷酸化細胞周期檢測點激酶2抗體|Phospho-CHK2 (ser19)
bs-2932R網格蛋白重鏈抗體|Clathrin heavy chain
bs-3845R透明質酸介導細胞游走受體抗體|CD168
bs-9804R2號染色體開放閱讀框24抗體|C2orf24
bs-9809R2號染色體開放閱讀框60抗體|C2orf60
bs-5248R磷酸化周期素依賴性激酶7抗體|phospho-CDK7 (Thr170)
bs-5249R磷酸化周期素依賴性激酶9抗體|Phospho-CDK9 (Thr29)
bs-5250R磷酸化細胞周期檢測點激酶1抗體|phospho-CHEK1 (Ser280)
bs-5251R磷酸化細胞周期檢測點激酶1抗體|phospho-CHEK1(Ser317)
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bs-5254R磷酸化抑癌基因p16抗體|phospho-CDKN2A (Ser152)
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bs-5252R磷酸化粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子受體β抗體|phospho-CSF2RB (Tyr766)
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bs-5184R磷酸化非受體*激酶c-Abl抗體|phospho-c-Abl(Tyr283)
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bs-15341R9號染色體開放閱讀框75抗體|C9orf75
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bs-2347R血小板糖蛋白GPIb抗體|CD42b
bs-4098R蛋白*N甲基4抗體|CARM1
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bs-4072R磷酸化原癌基因CBL2抗體|phospho-CBL2 (Tyr700)
bs-5148R細胞分裂周期蛋白7抗體|Cdc7
bs-5242R磷酸化細胞分裂周期蛋白25抗體|Phospho-cdc2 (Ser124)
bs-4094R細胞分裂周期蛋白25B抗體|Cdc25B
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bs-15170R3號染色體開放閱讀框25抗體|C3orf25
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bs-2986R陽離子通道精子相關蛋白1抗體|CATSPER
bs-13802R1號染色體開放閱讀框222抗體|C1orf222
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