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3-羥酰*脫氫酶(3HCD)酶聯(lián)免疫分析試劑盒操作詳解

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檢測范圍:                                                          48T

0.4ng/L -20ng/L

使用目的:

本試劑盒用于測定微生物樣本中3-羥酰輔酶A脫氫酶(3HCD)含量

實(shí)驗原理

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中3-羥酰輔酶A脫氫酶(3HCD水平。用純化的3-羥酰輔酶A脫氫酶(3HCD抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入3-羥酰輔酶A脫氫酶(3HCD),再與HRP標(biāo)記的3-羥酰輔酶A脫氫酶(3HCD抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMBHRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的3-羥酰輔酶A脫氫酶(3HCD呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中3-羥酰輔酶A脫氫酶(3HCD濃度。

計算

  以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。

注意事項

1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。

3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,*使用排槍加樣。

   4.請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

   5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

   6.底物請避光保存。

   7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

   9.本試劑不同批號組分不得混用。

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