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大鼠單核細胞趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)elisa試劑盒

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更新時間:2018-01-03 21:54:37瀏覽次數:216次

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大鼠單核細胞趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)elisa試劑盒雙抗體夾心法操作步驟:

1. 包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為110μgml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml4 **。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)   

2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37 孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)

3. 加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.1ml37 孵育0.51小時,洗滌。

4. 加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml37 1030分鐘。

5. 終止反應:于各反應孔中加入2M**0.05ml

6. 結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。

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